乳酸杆菌琼脂培养基(TrypticSoyAgar,TSA)是一种用于培养乳酸杆菌和其他需氧或兼性厌氧微生物的培养基,具有以下特点:1.**成分**:通常包含胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸二氢钾、柠檬酸铵、硫酸镁、硫酸锰、亚硫酸铁、吐温80和乙酸钠等。这些成分为细菌提供氮源、维生素、生长因子以及必需的矿物质。2.**pH值**:乳酸杆菌琼脂培养基的pH值一般调节至5.5±0.2(25℃),这是为了抑制其他非目标细菌的生长,同时促进乳酸杆菌的生长。3.**选择性**:柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群。乙酸的加入使pH值降低,进一步抑制其他细菌的生长。4.**用途**:主要用于乳酸菌的检测和分离培养,特别适用于食品、乳制品、饮料、饲料和医药等领域中的乳酸杆菌。5.**制备方法**:称取培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,并加入冰乙酸调节pH值,加热至完全溶解后分装,通常不需要高压灭菌。6.**培养条件**:乳酸杆菌琼脂培养基通常在36±1℃下培养24-48小时。7.**结果观察**:乳酸杆菌在该培养基上通常形成白色、半透明、光滑形凸起的圆形菌落。通过添加适量的血液,BHI Agar能够满足一些苛养菌的生长需求,常用于酵母和霉菌的培养。哥伦比亚血琼脂平板培养皿
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MAC)是一种具有中等选择性的培养基,主要用于分离和鉴定革兰氏阴性杆菌,尤其是肠道致病菌。以下是它的一些特点和用途:1.**成分**:麦康凯琼脂培养基的主要成分包括蛋白胨、胨、猪胆盐(或牛、羊胆盐)、氯化钠、琼脂、乳糖、结晶紫和中性红。这些成分共同作用,为细菌提供生长所需的营养,同时具有选择性和鉴别性。2.**选择性**:胆盐和结晶紫的添加可以抑制革兰氏阳性菌的生长,而促进某些革兰氏阴性菌(如大肠杆菌和沙门氏菌)的生长。3.**鉴别性**:乳糖作为可发酵的糖类,与中性红结合,可以区分发酵乳糖和不发酵乳糖的细菌。发酵乳糖的细菌会产生酸性环境,使中性红从无色变为红色,从而形成特征性的菌落颜色。4.**菌落特征**:在麦康凯琼脂培养基上,大肠杆菌通常形成红色或粉红色的菌落,而沙门氏菌和志贺氏菌则形成无色或淡色的菌落。5.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。6.**用途**:主要用于粪便、分泌物中肠道致病菌及肠球菌的分离培养,也用于检测或验证水、乳品和其他材料中的大肠菌群滴度。XLT4琼脂平板未来研究将进一步探索改良Letheen琼脂培养基在研究领域的优越性能,以及在微生物学实验设计中的灵活性。
营养肉汤(NB,NutrientBroth)是一种使用广的细菌培养基,具有以下特点:1.**成分**:主要由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠组成,为微生物提供氮源、碳源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时氯化钠维持培养基的渗透压。2.**pH值**:pH值通常控制在7.2-7.4,为细菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:适用于细菌的传代、培养、转种、复壮和增菌等,用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测以及其他需要一般细菌培养的实验中。4.**制备方法**:将适量的培养基粉末溶解在蒸馏水中,加热溶解后调整pH值至7.4-7.6,然后进行高压灭菌处理,备用。5.**安全性**:在制备和使用过程中,需要穿戴适当的防护设备,确保实验环境清洁,避免交叉污染,并按照实验室规章制度操作。6.**储存条件**:灭菌后的营养肉汤应储存在适当的条件下,通常是在冷藏环境中,并确保在有效期内使用。7.**外观**:制备好的营养肉汤应为淡黄色透明无沉淀的溶液。8.**微生物灵敏度**:可用于接种质控菌株,例如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,观察其生长情况,以确保培养基的适用性。9.**产品规格**:市面上有多种规格的营养肉汤产品,如250g包装,以及不同用途的培养基。
四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性增菌培养。它遵循中国药典(ChP)标准。**成分**:该培养基的主要成分包括蛋白胨、牛胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和维生素以满足细菌生长的需求;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;牛胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其他革兰氏阳性细菌。**pH值**:培养基的pH值通常调节至8.4±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨提供细菌生长所需的营养;碳酸钙中和细菌代谢产生的酸;硫代硫酸钠在培养基中与碘和碘化钾反应形成四硫磺酸钠,抑制非目标菌;牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌。**用法**:称取培养基46.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟。临用前,每1000ml培养基中加入碘试液20ml和亮绿试液10ml,混匀后分装备用。**添加剂**:每瓶培养基需配套添加碘液和0.1%煌绿水溶液。碘试液由碘6g与碘化钾5g加水20ml溶解制成。亮绿试液由亮绿0.1g加水100ml溶解制成。乳糖TTC琼脂培养基是一种选择性和区域性培养基,通常用于分离和鉴定肠道杆菌科细菌,特别是大肠埃希菌。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。马铃薯浸出液作为一种常见的植物提取物,具有丰富的碳水化合物、氮源和微量元素,是一种潜在的培养基成分。酵母膏-麦芽膏琼脂培养皿
通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。哥伦比亚血琼脂平板培养皿
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。哥伦比亚血琼脂平板培养皿