连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,TTB)是一种用于分离和富集沙门氏菌的选择性富集培养基。它通常包含胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙、硫代硫酸钠等成分。这种培养基通过提供特定的营养和抑制剂,有助于沙门氏菌的生长,同时抑制其他杂菌。以下是一些关于连四硫酸盐肉汤培养基的基础配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-动物组织消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-胆盐(BileSalts):1.0g-碳酸钙(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸钠(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化钾(PotassiumIodide):根据具体配方调整2.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入去离子水或蒸馏水。-加热煮沸以确保所有成分完全溶解。-分装至适宜的容器中,并进行高压灭菌。3.**使用说明**:-接种样品后,培养基可以在35°C或43°C下培养12至24小时。-培养后,可以将培养物接种到其他选择性培养基上,如XLD琼脂、亚硫酸铋琼脂、SS琼脂等,以进一步分离和鉴定沙门氏菌。EMB培养基的两种染料是:1.艾奥辛(Eosin);2.亚甲蓝(Methylene Blue)。溴甲酚紫琼脂平板
煌绿乳糖胆盐肉汤(BrilliantGreenLactoseBileBroth,简称BGLB)是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于大肠菌群的确证试验。以下是其主要特点和相关信息:1.**成分**:BGLB培养基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛胆粉和煌绿。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆粉和煌绿则用于抑制非肠杆菌科细菌的生长。2.**配方**:每升培养基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛胆粉和0.0133g煌绿,pH值调节至7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:蛋白胨提供微生物生长所需的碳氮源;乳糖作为可发酵的糖类;煌绿是一种具有抑菌能力的染料,牛胆粉和煌绿抑制非肠杆菌科细菌。4.**使用方法**:称取40.0gBGLB培养基,加入1000ml蒸馏水中,煮沸溶解,分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、粪肠球菌ATCC29212等,进行培养并观察结果。大肠埃希氏菌和弗氏柠檬酸杆菌在BGLB培养基中应表现出生长,而粪肠球菌则应不生长或生长微弱。嗜冷菌计数琼脂平板NAC琼脂培养皿可以用于微生物的计数和定量,通过培养皿计数法可以快速准确地确定微生物的数量。
大豆酪蛋白肉汤培养基(TrypticSoyBroth,TSB)是一种通用的微生物培养基,应用于细菌的培养,特别是在药品抑菌剂效力检测中用于细菌检测。以下是其特点介绍:1.**成分**:TSB培养基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氢二钾和氯化钠。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。2.**pH值**:TSB培养基的pH值通常调整至7.3±0.2(25℃),适合多种微生物的生长。3.**用途**:TSB培养基适用于的细菌培养,包括需氧菌和厌氧菌。它特别用于消毒剂消毒效果的测试、蜡样芽孢杆菌的多管发酵法测定、溶血性链球菌选择性增菌培养等。4.**制备方法**:将TSB培养基粉末称量后溶解于蒸馏水或去离子水中,加热煮沸以帮助溶解,然后进行高压灭菌。5.**质量控制**:在使用TSB培养基时,应进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存。7.**有效期**:在适当的储存条件下,TSB培养基的有效期通常为三年
乳糖胆盐发酵培养基(LactoseBileFermentBroth)是一种用于微生物学检测的培养基,主要用于检测和分离大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其主要特点和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆盐用于抑制革兰氏阳性细菌的生长,溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**pH值**:一般调节至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管发酵法测定药品、食品、饮用矿泉水、一次性使用卫生用品中大肠菌群的存在。4.**检验原理**:大肠菌群能够发酵乳糖产生酸性物质,导致培养基颜色变化,并且可能产生气体。5.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品接种到培养基中,进行培养并观察结果。6.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,来验证培养基的选择性和生长促进效果。7.**储存条件**:通常需要在避光、干燥的环境中储存,并在用后立即旋紧瓶盖,以保持其稳定性。琼脂培养基的制备: 将琼脂培养基中加入去氧胆酸盐等特定成分,以制备适合特定实验目的的培养基。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。改良后的Letheen琼脂培养基不仅限于传统的应用,还可能拓展到食品微生物学、环境微生物学等领域。改良Campy-Cefex琼脂预装培养皿
通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。溴甲酚紫琼脂平板
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。溴甲酚紫琼脂平板