强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专门用于培养梭菌属(Clostridium)细菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐等,这些成分为梭菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌和一些非目标细菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,进行高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。NAC琼脂培养皿是一种常用于微生物学研究的培养基,其含有富含氨基酸的天然琼脂,以及氯霉素、氨苄青霉素。WS琼脂预装培养皿
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。LA平板改良后的Letheen琼脂培养基不仅限于传统的应用,还可能拓展到食品微生物学、环境微生物学等领域。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。
0.1%蛋白胨水培养基是一种用于微生物培养的溶液,具有以下特点:1.**低浓度蛋白胨**:培养基中蛋白胨的浓度为0.1%,为微生物提供氮源。2.**pH值稳定**:pH值控制在7.1±0.2,为微生物生长提供适宜的酸碱环境。3.**用途广**:主要用于样品的稀释和冲洗,也适用于微生物的增菌培养。4.**简单配方**:主要成分为蛋白胨和蒸馏水,配方简单,易于配制。5.**质量控制**:具有明确的感官、理化指标和生物学指标,确保培养基的稳定性和适用性。6.**微生物灵敏度试验**:可用于接种质控菌株,进行需氧培养,观察生长情况。7.**储存条件**:应在2~25℃,避光保存,保证培养基的有效期和活性。8.**使用方法**:从储藏室取出后恢复至室温,用75%酒精消毒瓶盖,按规定方法进行加样,之后置于培养箱中按规定温度和时间培养。9.**灭菌处理**:使用前需经过121℃高压灭菌15分钟,确保培养基的无菌状态。这些特点使得0.1%蛋白胨水培养基成为微生物实验室中常用的培养基之一,特别适合用于微生物的初步培养和计数。当大肠杆菌等革兰氏阴性菌在培养皿上形成典型的红色或粉红色菌落时,这表明它们具有葡萄糖发酵的能力。
品红亚硫酸钠液体培养基(EndoAgar),也称为远藤琼脂培养基,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于饮用水和水源中总大肠菌群的选择性分离和确证,符合GB(中国国家标准)的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氢二钾:3.5g-乳糖:10.0g-琼脂:13.0g-碱性品红:1.0g-亚硫酸钠:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和矿物质。-乳糖作为可发酵的糖类,用于检测细菌的乳糖发酵能力。-亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色。-发酵乳糖的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落。-快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明菌落。**使用方法**:-称取本品52.5g,加入20mL无水乙醇和980mL蒸馏水(可根据培养需要扩大或缩小产品用量),加热搅拌溶解。-按需分装,116℃高压灭菌20分钟,备用。-质控菌液按国标等标准或其它方法制备而成。-取相应菌液按涂布或划线方式接种于培养基中。-将接好菌的平板倒置放入恒温培养箱,于36±1℃需氧培养24±2小时,观察实验结果。EMB是Eosin Methylene Blue的缩写,这是一种含有两种染料的培养基。TSA+卵磷脂+吐温80预装培养皿
接种: 使用无菌的技术在琼脂培养基表面接种待测样品,可以是从食品、水样或其他来源收集的微生物样品。WS琼脂预装培养皿
乳糖发酵培养基(LactoseFermentBroth),也称为乳糖复发酵培养基,是一种用于微生物检测的培养基,主要用于测定大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其特点和相关信息:1.**用途**:用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。2.**实验原理**:蛋白胨提供碳源和氮源以满足细菌生长的需求;乳糖作为大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性环境下呈黄色,碱性环境下呈紫色。3.**成分**:通常包含蛋白胨20.0g/L、乳糖10.0g/L、溴甲酚紫0.01g/L,pH值调节至7.4±0.1(25℃)。4.**使用方法**:称取培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和阴沟肠杆菌ATCC23355,来验证培养基的选择性和生长促进效果。6.**细菌生长特征**:不同细菌在乳糖发酵培养基上的生长特征不同,例如大肠埃希氏菌通常会产生酸性环境,使得培养基颜色变为黄色,并可能产生气体。7.**储存和运输条件**:未开盖的乳糖发酵培养基的保质期通常为6个月,需要在4-10度的条件下保存,运输时应保持常温。