曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。与传统琼脂培养基相比,马铃薯浸出液琼脂培养皿中的微生物生长速度更快,菌落形态更为清晰。桔汁琼脂平板
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基是一种专门用于检测β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)活性的培养基,具有以下特点:1.**荧光检测**:MUG作为荧光底物,在β-葡萄糖醛酸苷酶作用下,裂解后产生蓝色荧光终产物,可通过紫外线监测。2.**应用广**:MUG培养基用于荧光检测大鼠体内的β-葡萄糖醛酸苷酶基因表达,也用于植物中葡萄糖醛酸酶基因的表达进行荧光检测。3.**产品特性**:MUG具有纯度≥99%,熔点102°C,分子量为352.29(无水基础),在冷冻(-20℃)条件下储存。4.**培养基配方**:包含蛋白胨、磷酸盐缓冲系统、硫酸锰、亚硫酸钠、去氧胆酸钠、硫酸镁、氯化钠、氯化钙和MUG等成分,pH值控制在7.3±0.1(25℃)。5.**操作步骤**:包括称取培养基粉末溶解、分装、灭菌、接种质控菌液、培养和观察有无荧光等步骤。6.**试验现象**:接种大肠埃希氏菌等质控菌株,在30-35℃培养后,通过366nm紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。7.**安全性**:操作MUG时应穿实验服并戴一次性手套,以确保安全。8.**应用示例**:包括细菌培养物的荧光检测和转基因植物GUS基因的表达测定。9.**储存与运输**:MUG培养基应-20℃干燥保存,有效期2年,运输时使用冰袋。TSAP80平板VRBA培养基提供了一种简便而有效的方法,用于选择性地富集和分离肠道细菌。
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。
pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液是一种用于微生物培养的溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.0,为微生物提供适宜的酸碱环境。2.**成分**:由蛋白胨、无水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和氯化钠组成,其中蛋白胨提供氮源、维生素和氨基酸,氯化钠维持渗透压,磷酸盐作为缓冲系统。3.**用途**:主要用于样品制备的营养液,也适用于药品和生物制品的稀释。4.**配制方法**:通常按照一定的比例称取粉末,溶解在纯化水中,然后进行高压灭菌处理。5.**质量控制**:通过接种质控菌株进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的适用性。6.**储存条件**:应在2~25℃,避光保存,保证培养基的有效期和活性。7.**保质期**:通常保质期为三年。8.**注意事项**:在使用时应注意无菌操作,避免污染,并在开封后立即封闭以保持稳定性。9.**执行标准**:符合中国药典等标准,确保产品质量。10.**废物处理**:使用后的带菌物品应进行高压灭菌处理后再进行常规废物处理。这些特点使得pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液成为实验室中常用的缓冲溶液之一,广泛应用于微生物学研究和生物制品的制备。改良后的Letheen琼脂培养基不仅限于传统的应用,还可能拓展到食品微生物学、环境微生物学等领域。
EEM培养基(Eagle'sMinimumEssentialMedium)是一种用于细胞培养的培养基,由HarryEagle研发。它是一种营养丰富的细胞培养基,广泛应用于各种细胞的培养,包括贴壁细胞和悬浮细胞。EEM培养基的特点是含有较低的碳酸氢钠含量,适用于5%CO2条件下的细胞培养。如果培养条件中CO2浓度高于5%,则需要增加碳酸氢钠的含量。**成分**:EEM培养基包含Earle'ssalts、L-谷氨酰胺、丙酸钠和碳酸氢钠等。它还含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,以及其他必要的营养成分。**用途**:EEM培养基适用于多种细胞系的培养,包括HeLa细胞、各种成纤维细胞、内皮细胞、人肿瘤细胞等。它也可用于选择转染DHFR的阴性细胞。**保存条件**:建议在2-8°C避光条件下保存。**产品外观**:通常为红色透明液体,无沉淀。**培养基保质期**:在正确的保存条件下,培养基的保质期通常为12个月。**质量控制**:培养基的质量控制包括观察培养基是否有变色、结块或成粒、不溶等现象,以及液体培养基是否有pH变化、沉淀物出现、溶液变浑浊或变色等情况。配制方法:通常,EEM培养基会以无菌即用的形式提供,但如果需要自行配制,应按照制造商提供的配方和方法进行。
EMB培养基的特点是它对大肠杆菌等产酸革兰氏阴性菌的选择性较强。桔汁琼脂平板
大豆酪蛋白肉汤培养基(TrypticSoyBroth,TSB)是一种通用的微生物培养基,应用于细菌的培养,特别是在药品抑菌剂效力检测中用于细菌检测。以下是其特点介绍:1.**成分**:TSB培养基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氢二钾和氯化钠。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。2.**pH值**:TSB培养基的pH值通常调整至7.3±0.2(25℃),适合多种微生物的生长。3.**用途**:TSB培养基适用于的细菌培养,包括需氧菌和厌氧菌。它特别用于消毒剂消毒效果的测试、蜡样芽孢杆菌的多管发酵法测定、溶血性链球菌选择性增菌培养等。4.**制备方法**:将TSB培养基粉末称量后溶解于蒸馏水或去离子水中,加热煮沸以帮助溶解,然后进行高压灭菌。5.**质量控制**:在使用TSB培养基时,应进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存。7.**有效期**:在适当的储存条件下,TSB培养基的有效期通常为三年