强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专门用于培养梭菌属(Clostridium)细菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐等,这些成分为梭菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌和一些非目标细菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,进行高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。去氧胆酸盐琼脂这种琼脂培养基在检测大肠杆菌等肠道革兰氏阴性菌方面具有一定的选择性。综合苏通琼脂结核杆菌的增菌培养培养皿
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。轻唾琼脂平板此外,BHI Agar可以根据实验需要添加不同的补充剂,如血液、等,以增强其选择性或提供额外的营养。
乳糖胆盐发酵培养基(LactoseBileFermentBroth)是一种用于微生物学检测的培养基,主要用于检测和分离大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其主要特点和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆盐用于抑制革兰氏阳性细菌的生长,溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**pH值**:一般调节至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管发酵法测定药品、食品、饮用矿泉水、一次性使用卫生用品中大肠菌群的存在。4.**检验原理**:大肠菌群能够发酵乳糖产生酸性物质,导致培养基颜色变化,并且可能产生气体。5.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品接种到培养基中,进行培养并观察结果。6.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,来验证培养基的选择性和生长促进效果。7.**储存条件**:通常需要在避光、干燥的环境中储存,并在用后立即旋紧瓶盖,以保持其稳定性。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。NAC琼脂培养皿中含有富含氨基酸的天然琼脂,能够提供微生物生长所需的丰富营养物质。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。改良Letheen琼脂培养基广泛应用于化妆品中微生物的检测,因为它能中和化妆品中的防腐剂。ISP Medium 5培养皿
琼脂培养基的制备: 将琼脂培养基中加入去氧胆酸盐等特定成分,以制备适合特定实验目的的培养基。综合苏通琼脂结核杆菌的增菌培养培养皿
营养肉汤(NB,NutrientBroth)是一种使用广的细菌培养基,具有以下特点:1.**成分**:主要由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠组成,为微生物提供氮源、碳源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时氯化钠维持培养基的渗透压。2.**pH值**:pH值通常控制在7.2-7.4,为细菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:适用于细菌的传代、培养、转种、复壮和增菌等,用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测以及其他需要一般细菌培养的实验中。4.**制备方法**:将适量的培养基粉末溶解在蒸馏水中,加热溶解后调整pH值至7.4-7.6,然后进行高压灭菌处理,备用。5.**安全性**:在制备和使用过程中,需要穿戴适当的防护设备,确保实验环境清洁,避免交叉污染,并按照实验室规章制度操作。6.**储存条件**:灭菌后的营养肉汤应储存在适当的条件下,通常是在冷藏环境中,并确保在有效期内使用。7.**外观**:制备好的营养肉汤应为淡黄色透明无沉淀的溶液。8.**微生物灵敏度**:可用于接种质控菌株,例如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,观察其生长情况,以确保培养基的适用性。9.**产品规格**:市面上有多种规格的营养肉汤产品,如250g包装,以及不同用途的培养基。