营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。MIO培养基是一种用于细菌鉴定的生化培养基,它能够进行动力、吲哚和鸟氨酸脱羧酶试验。CW琼脂基础(不含卡那霉素)
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。烟酸测定在使用BCPA培养基前,需要进行质量控制,确保培养基的组成、pH值和灭菌条件符合要求,以保证检测的准确性 。
LG培养基(LindenGrainMedium)是一种用于微生物检测的培养基,其特点和用途如下:1.**用途**:LG培养基主要用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测,也可用于PET瓶及无菌罐装生产线的无菌验证。2.**成分**:LG培养基的主要成分包括胰蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾和硫酸镁。3.**实验原理**:在LG培养基中,胨提供碳源和氮源;酵母浸出粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;硫酸镁提供必需的微量元素;硫酸铵可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长。4.**pH值**:培养基的pH值通常控制在6.5-6.8之间。5.**制备方法**:称取29.5g的LG培养基,加入1L的蒸馏水或去离子水中,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管或三角瓶,121℃灭菌15分钟。注意,培养基中含少量硫酸镁,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:接种质控菌株后,放置36±1℃需氧培养18-24小时,菌于28~32℃培养3-5天。例如,金黄色葡萄球菌ATCC6538、铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6633、白色念珠菌CMCC98001、酵母菌CMCC98007和黑曲霉菌CMCC98003在该培养基上应有良好的生长情况。
改良卵磷脂肉汤(ModifiedLetheenBroth,MLB)是一种用于微生物检测的培养基,它在抗菌洗手液细菌检测中具有实用性。以下是改良卵磷脂肉汤的一些特点和制备方法:1.**成分**:改良卵磷脂肉汤的主要成分包括牛肉提取物、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、吐温-80、卵磷脂、氯化钠和亚硫酸盐。这些成分提供了碳氮源、维生素和生长因子,同时卵磷脂和吐温-80有助于中和防腐剂,并在乳浊液中分散物质。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在6.9~7.3之间。3.**制备方法**:-称取42.8g的培养基粉末,加入1000mL的蒸馏水或去离子水中。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到试管中,进行121℃高压灭菌15分钟。4.**应用**:改良卵磷脂肉汤用于化妆品微生物检测中的样品稀释和增菌。它能有效中和抑菌类产品中的抗(抑)菌活性物质,提高微生物检出率。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株进行生长测试,确保培养基的质量符合标准。例如,金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠埃希氏菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853在该培养基上应有良好的生长情况。MEE肉汤(MEE Broth)是一种用于肠道菌选择性增菌培养的培养基。如大肠杆菌等肠杆菌科细菌的检测和分离。
改良R2A琼脂(R2AAgar)是一种低营养培养基,主要用于对处理过的饮用水进行细菌学平板计数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点:1.**成分**:改良R2A琼脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、木酮酸钠和琼脂。这些成分提供氮源、维生素、氨基酸、碳源、矿物质,同时木酮酸钠有利于受损细胞的恢复,可溶性淀粉能够吸附有毒的代谢副产物,有利于受损微生物的恢复。2.**pH值**:改良R2A琼脂的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:改良R2A琼脂特别适用于饮用水、纯化水、注射用水中微生物的分离、培养、计数和鉴定。它能够让受损的和耐氯细菌恢复生长,同时又不会被快速生长微生物所掩盖。4.**制备方法**:称取适量培养基,用蒸馏水重悬溶解,推荐115℃灭菌20分钟;也可121℃灭菌15分钟。5.**质量控制**:接种质控菌株,如铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6623、大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538等,放置30-35℃需氧培养48-120小时,以确保培养基的质量符合标准。SIM培养基的配方通常包含胰胨、多价胨、硫酸铁铵、硫代硫酸钠和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源。Schaedler肉汤
TSI 培养基可根据细菌的不同反应特征,有效区分大肠埃希氏菌、沙门菌属等常见肠道菌。CW琼脂基础(不含卡那霉素)
巴氏芽孢杆菌固体培养基的特点主要包括以下几个方面:1.**多层保护结构**:巴氏芽孢杆菌的芽孢具有多层保护结构,包括芽孢外壳和芽孢皮层,这些结构由多种蛋白质组成,能够在恶劣环境下保护细菌的基因组。2.**高抵抗力**:芽孢对热、紫外线、化学试剂和辐射等环境压力具有极高的抵抗力。这种抵抗力部分归因于芽孢外壳和皮层的特殊结构,以及芽孢中心中的低水分含量和高浓度的二价阳离子与二吡咯烷酮酸(DPA)的结合。3.**特定的培养条件**:巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基和特定的温度(如30°C)和时间(18-24小时)来诱导芽孢形成。4.**特定的化学成分**:固体培养基的化学成分对芽孢的形成和特性有重要影响。例如,CASOAGAR+20g/L尿素是一种用于巴氏芽孢杆菌的培养基,其成分包括酪蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠和琼脂,pH值为7.3。5.**芽孢的萌发**:芽孢外壳必须既具有保护性又具有渗透性,以允许小分子萌发剂通过并触发芽孢的萌发过程。萌发剂包括糖类、氨基酸、肽聚糖片段和离子。CW琼脂基础(不含卡那霉素)