营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。某些细菌能产生尿素酶,将尿素分解产生氨,使培养基变为碱性,酚红指示剂在pH升高时变色(通常为粉红色)。Baird-Parker琼脂平板
轻唾琼脂培养基(MSA)基础是一种用于分离培养轻型唾液链球菌的选择性培养基。以下是使用轻唾琼脂培养基(MSA)进行细菌分离和鉴定的步骤:1.**制备培养基**:-称取90gMSA粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-加热煮沸至完全溶解。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃,加入1mL无菌1%亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。2.**接种样本**:-将待测样本如咽拭子、尿液或其他临床样本进行适当的稀释。-将稀释后的样本均匀地涂布在MSA平板上。3.**培养**:-将接种后的培养皿置于35-37°C的培养箱中培养18-48小时。4.**观察菌落生长**:-观察培养基上生长的菌落,注意菌落的颜色、形态和大小。-肠球菌在MSA上通常形成蓝色-黑色的菌落。5.**挑选可疑菌落**:-挑取可疑的菌落进行纯化培养。6.**进行生化试验**:-对纯化后的菌株进行一系列的生化试验,如糖发酵试验、CAMP试验、胆汁七叶苷试验等,以进一步鉴定菌种。7.**结果分析**:-根据菌落特征和生化试验结果,结合菌株的形态学特征,进行菌种的鉴定。8.**报告结果**:-将鉴定结果整理成报告,包括菌株的名称、数量和相关的生化特性。YPD培养基平板TGC液体培养基需要进行高压灭菌,以确保无菌。常用的灭菌方法包括加热灭菌、过滤除菌、及化学试剂灭菌等。
胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)基础是一种用于微生物学实验的培养基,主要用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试实验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:TSSB基础的配方包含胰酪胨、植物蛋白胨、氯化钠、无水磷酸氢二钾、葡萄糖和琼脂等。具体成分为每升培养基中包含胰酪胨15.0克、植物蛋白胨5.0克、氯化钠5.0克、无水磷酸氢二钾2.5克、葡萄糖2.5克和琼脂12.0克。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加脱纤维羊血使用,以提供红细胞,检测微生物溶血特性。5.**检验原理**:胰酪胨、植物蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需的碳源、氮源、维生素及矿质元素等;无水磷酸二氢钠作为pH缓冲体系;琼脂作为凝固剂;脱纤维羊血提供红细胞,检测微生物溶血特性。6.**用法**:称取本品42.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃时,加入5-10ml无菌脱纤维羊血,混匀后倾注平板,备用。7.**质量控制和典型特征**:在30-32℃培养18-24小时,蜡样芽孢杆菌典型特征为在菌落周围呈现β型完全溶血的溶血环。
CATC琼脂是一种用于分离和培养肠球菌的选择性培养基,特别适用于食品和饮料中肠球菌的分离培养。以下是它的一些特点:1.**成分**:含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、柠檬酸钠、吐温80、碳酸钠、叠氮钠和红四氮唑(TTC)等成分,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.0±0.2(25℃),适合肠球菌的生长。3.**选择性**:叠氮钠可以抑制革兰氏阴性菌的生长,而红四氮唑(TTC)可以作为指示剂,粪肠球菌能将TTC还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。4.**应用**:主要用于食品和饮料中肠球菌的分离培养,也可用于生活饮用水中肠球菌的计数。5.**配制方法**:通常称取58.5g的培养基粉末,加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至50-55℃时倾入无菌平皿备用,无需高压灭菌。6.**质量控制**:质控菌株如粪肠球菌(ATCC29212)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)等在CATC琼脂上的生长情况可以用于评估培养基的性能。7.**储存条件**:CATC琼脂通常在避光、干燥处保存,保质期可达三年。8.**用途**:除了用于食品和饮料中肠球菌的分离外,还适用于水质检测中的肠球菌计数。哥伦比亚肉汤能够支持包括细菌、酵母和霉菌在内的多种微生物的生长,尤其适合培养营养要求高的微生物。
酵母浸粉葡萄糖琼脂(YPDA)是一种常用的微生物培养基,尤其是在酵母菌的培养中。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和琼脂。具体配方为1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固体培养基,加入2%琼脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常调节在6.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。葡萄糖溶液灭菌后加入,以避免高温下可能发生的化学反应导致培养基成分变化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培养,也用于药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉,然后进行高压灭菌。灭菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**储存条件**:液体YPDA培养基可常温保存;琼脂YPDA平板在4℃可保存几个月。7.**微生物生长特征**:不同细菌在酵母浸粉葡萄糖琼脂培养基上的生长特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌则有黑色孢子。蜡样芽孢杆菌在木糖明胶培养基中不发酵木糖,培养基颜色不变,液化明胶作为典型特征 。麦康凯琼脂USP培养皿
PK琼脂培养基用于培养和分离特定的微生物,如肠道杆菌等。它也可用于微生物的鉴定,通过观察菌落形态等。Baird-Parker琼脂平板
DPD培养基(DPDMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,其特点是全无机盐配方,适用于多种植物细胞的培养。以下是DPD培养基的一些关键特点:1.**成分**:DPD培养基包含多种无机盐和有机物,如硝酸铵、硫酸钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸二氢钾、硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)、硫酸锰、钼酸钠、硼酸、硫酸锌、硫酸铜、氯化钴、碘化钾、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、肌醇、叶酸、甘氨酸、生物素、蔗糖、甘露醇、2,4-D和激动素等。2.**pH值**:培养基的pH值调整至5.8,以满足植物细胞生长的需要。3.**用途**:DPD培养基主要用于植物组织的培养,包括植物细胞、组织的生长和发育。4.**配制方法**:通常称取一定量的DPD培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌。5.**保存条件**:DPD培养基的保质期通常为三年,应避光、干燥保存,或根据需要保存于2-8°C。6.**注意事项**:在使用时,应检查培养基是否有颜色变化、蒸发/脱水情况或微生物生长。培养基融化后应立即使用,避免重复融化和长时间放置。7.**用法**:在使用前,需要调整pH值至5.8,并进行高压灭菌处理。DPD培养基因其成分稳定和适用性广,在植物组织培养领域有着广泛的应用。 Baird-Parker琼脂平板