BTB琼脂是一种用于微生物培养的培养基,其特点主要包括:1.**成分**:BTB琼脂的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、氯化钠、Teepol和溴麝香草酚蓝(BTB)。牛肉膏和蛋白胨提供细菌生长所需的基本营养,蔗糖作为可利用的碳源,氯化钠有助于弧菌的生长并抑制其他细菌,Teepol可抑制多数革兰氏阳性菌的生长,BTB作为酸碱指示剂。2.**pH值**:BTB琼脂的pH值通常控制在7.8±0.1(25℃)。3.**用途**:BTB琼脂常用于弧菌的选择性增菌培养,也可以加入琼脂制成固体培养基,用于弧菌的分离培养。4.**制备方法**:称取BTB培养基48.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管5ml,115℃高压灭菌20分钟,备用。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如创伤弧菌ATCC27562、霍乱弧菌、溶藻弧菌ATCC17749、副溶血性弧菌ATCC17802等,放置36±1℃需氧培养18-24小时。6.**储存条件**:BTB培养基应放置阴凉干燥处保存。7.**注意事项**:BTB指示剂应为绿色或蓝色溶液,pH在7.1~8.5较适宜,如变为黄色或黄绿色,说明pH降低,可滴加少量稀氨水或氢氧化钠等碱性试剂调整后即可正常使用。在使用BCPA培养基前,需要进行质量控制,确保培养基的组成、pH值和灭菌条件符合要求,以保证检测的准确性 。麸皮液体培养基
麦氏(Meclary)琼脂是一种用于菌培养的培养基,其特点包括:1.**配方**:包含酵母浸粉、葡萄糖、氯化钾、醋酸钠和琼脂等成分,pH值控制在6.4±0.2(25℃),为菌提供适宜的生长环境。2.**配制方法**:称取28.5克麦氏琼脂培养基干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行115℃高压灭菌30分钟,备用。3.**用途**:适用于菌培养,特别用于某些霉菌和酵母菌的分离和培养。4.**pH值**:pH值对菌的生长至关重要,麦氏琼脂的pH值适应了某些菌对生长环境的酸碱度要求。5.**选择性**:可能具有一定的选择性,有助于特定类型菌的生长,同时抑制或限制其他微生物的生长。6.**应用**:它常用于实验室中菌的分离、鉴定和计数。通过麦氏琼脂培养基进行菌的分离与鉴定通常包括以下步骤:1.**样品收集**:从疑似有菌存在的环境或物体表面采集样本。2.**样品处理**:将采集的样本进行适当的预处理,如稀释、均质化等。3.**接种**:将处理过的样品接种到麦氏琼脂培养基上。4.**培养**:将接种后的培养基放入恒温培养箱中进行培养,一般温度控制在25℃左右。5.**观察**:在培养过程中定期观察,记录菌落的生长情况、形态特征等。改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨(mLST)肉汤基础它具有较强的缓冲能力,能在一定程度上抵御外界环境变化对微生物生长的影响。
碱性蛋白胨水(AlkalinePeptoneWater,简称APW)是一种常用的微生物培养基,主要用于嗜碱性细菌特别是弧菌的选择性增菌培养。以下是APW的一些关键特点和应用:1.**成分**:APW的主要成分包括蛋白胨和氯化钠。蛋白胨提供碳源和氮源,而氯化钠维持均衡的渗透压。2.**pH值**:APW的pH值通常控制在8.5±0.2(25℃),这种碱性环境有利于抑制非弧菌类细菌的生长,同时不影响副溶血性弧菌等嗜碱性细菌的生长。3.**制备方法**:称取适量的APW培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中,加热搅拌直至完全溶解,然后进行高压灭菌。4.**应用**:APW用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养,也可直接用于弧菌的镜检。它用于食品、水和临床样本中的弧菌增菌培养。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株进行生长测试,确保培养基的质量符合标准。例如,副溶血弧菌ATCC17802在该培养基中应表现出浓密生长。6.**储存条件**:APW应在2-25℃的条件下避光保存,以保持其有效性。7.**注意事项**:在操作过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。使用后的干粉培养基应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。LIM培养基是一种用于细菌生化鉴定的培养基,特别是它在检测细菌的动力、和赖氨酸脱羧酶活性方面具有应用。
TGE肉汤(含TTC)是一种用于细菌总数测定的培养基,其特点和制备方法如下:1.**成分**:TGE肉汤的主要成分包括酵母浸粉、牛肉浸粉、葡萄糖和三苯基四氮唑氯化物(TTC)。其中,酵母浸粉和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类提供能源;TTC作为指示剂,用于检测细菌的生长活性。2.**pH值**:TGE肉汤的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃)。3.**制备方法**:-称取18g的TGE肉汤干粉,加入1L的蒸馏水或去离子水中。-加热搅拌直至完全溶解。-在121℃下高压灭菌15分钟。-待培养基冷却至室温后,即可使用。4.**应用**:TGE肉汤(含TTC)用于滤膜法细菌总数计数,特别适用于奶制品中细菌总数的测定。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923等,放置35±2℃需氧培养18-24小时,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TGE肉汤(含TTC)应贮存于常温、避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖。7.**注意事项**:在称量和操作过程中应注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。使用后的干粉培养基应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。LB琼脂主要由胰蛋白胨(10g/L)、酵母提取物(5g/L)、氯化钠(10g/L)和琼脂(15-20g/L)组成。改良霍格兰氏营养液添加剂
BCPA 培养基的成分明确,方便研究人员根据实验需求进行调整和优化。麸皮液体培养基
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。麸皮液体培养基