Leeming-Notman培养基(LN培养基)是一种用于培养马拉色菌属(Malassezia)的培养基。该培养基的配方包含多种营养成分,能够促进马拉色菌的生长。以下是Leeming-Notman培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛胆盐(Oxbile,desiccated):8.0g-单硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐温60(Tween60):5.0mL-橄榄油(Oliveoil):20mL-琼脂(Agar):15g-去离子水(Deionizedwater):1.0L-pH值调整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至指定范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。-冷却至50-55℃后,无菌加入添加剂。3.**用途**:-主要用于培养马拉色菌属的菌,这些菌与人类皮肤有共生关系,并且在医学研究中具有重要意义。4.**保存条件**:-通常在2-8°C下保存,保质期通常为两年。5.**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。
弯曲杆菌琼脂基础是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特点:1.**选择性培养**:弯曲杆菌琼脂基础通常与特定的选择性添加剂一起使用,如改良Karmali选择性添加剂或弯曲杆菌选择性添加剂,这些添加剂含有抗生物质,如万古霉素和两性霉素B,以抑制其他非目标微生物的生长,提高目标弯曲杆菌的分离率。2.**无血培养基**:某些类型的弯曲杆菌琼脂基础是无血的,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。无血培养基通常使用活性炭、硫酸亚铁和酸钠替代血液。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%。因此,弯曲杆菌琼脂基础通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在适宜的条件下,空肠弯曲杆菌在弯曲杆菌琼脂基础中生长,形成灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.配方:弯曲杆菌琼脂基础的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化钠、琼脂等,提供碳、氮源、维生素和生长因子。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等,培养后观察菌落生长。缓冲MUG琼脂预装培养皿
在冷冻保存过程中,使用保护剂如甘油、血清、糖类等,可以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害 。缓冲MUG琼脂预装培养皿
庆大霉素琼脂基础是一种用于微生物培养的培养基,其特点和应用如下:1.**用途**:主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养,符合GB标准。2.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉浸粉:3.0g/L-亚硫酸钠:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-蔗糖:10.0g/L-庆大霉素:250IU/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.3-8.7(25℃)3.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-蔗糖提供碳源;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-枸橼酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。4.**配制方法**:-称取本品56.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,加入无菌1%亚碲酸钾溶液0.5ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。-无需高压灭菌。5.**微生物质控结果**:-霍乱弧菌VBO:生长率PR≥0.7,淡灰色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922:选择性G≤3,无生长。庆大霉素琼脂基础因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。缓冲MUG琼脂预装培养皿