每隔2天用电阻仪测量细胞跨膜电阻值,直到达到平台,提示细胞已经形成致密单层;或者通过检测荧光染料荧光黄的通过率,以判断细胞刚好完全汇合。电阻仪测量因不伤害细胞,可以继续培养而比荧光黄法更为普遍地被采用。细胞单层汇合后,用DPBS清洗一次细胞,加入含有不同浓度药物(一般10-200μM)的缓冲液。如果要测药物从上至下的运输效果,则上层小室中加药物,下层培养板孔里只加缓冲液;反之则相反。将培养板在37℃条件下培养(60rpm震荡或者不震荡)1-2h,到达时间之后,分别从细胞小室和培养孔里取出一定 体积缓冲液(一般50μL )转移至新的转运分析板进行LC/MC分析。对于放射性标记药物,分别取出20μL缓冲液加入100μL闪烁液,通过多孔闪烁读板仪读值。上海益启生物培养基订购方便。杨浦区血清细胞培养代理价
c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 µ g/mL ,以5-10µg/cm2的密度加入到细胞小室的上层(按照ECM产品说明书的推荐比例和体积),轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中,于37°C孵育1小时,ECM胶可由液体凝成固体,吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的无血清培养基中和,1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞,调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。黄浦区培养基细胞培养联系方式上海益启生物酶订购方便。
BioporefPTFE)膜有助于提高细胞的存活力,**长超过40天;膜的透氧性及透光性也非常出色,推荐用于长期组织结构研究等有挑战性的应用。 主要优点 •经优化的膜确保获得可靠的单层细胞结构 •透明膜易于观察和监控细胞生长 •为各种培养和细胞水平研究制造了各种方便的产品形式 规格 Millicell®站立式细胞培养小室 Millicell® 和MultiScreen® 多孔板 膜质培养表面塑料多孔板根据其膜材质、膜孔径及培养孔的数量分为很多产品。我们的Millicell® 培养板其顶部、底部及侧面的特殊设计及垫高的 边角都使它更适合Caco-2细胞培养。Millicell®细胞培养板对于获得和维持单层细胞效果很好。
PET膜 (聚乙烯对苯二酸酯) 功能***,是悬挂式Millicell®***采用的膜材质 10μm超薄蚀刻膜,其中孔径为1μm规格的透明性较好,可用于直接观察。低荧光背景,低蛋白吸附,孔径齐全,不需要ECM细胞即能生长良好。是悬挂式Millicell小室的***用膜。 Millicell® 24 和 Millicell® 96 嵌套式细胞培养板及组件 精心的设计,配合电阻仪使Caco-2 等高通量实验获得稳定的比较好效果 **侵袭实验 实验目的:研究**细胞侵袭能力 本实验技术要点: 实验简介: **细胞侵袭能力检测在**学(迁移、侵袭)和免疫学(迁移、趋化)中是常规实验。 侵袭是细胞迁移的一种。细胞迁移分三种类型:趋触、趋化和侵袭。趋触是指细胞定向向一些整联蛋白或粘附蛋白受体迁移的能力,例如上皮细胞和成纤维细胞;趋化指细胞趋向于一些化学分子的特性,例如免疫细胞;侵袭通常指**细胞分泌因子降解并穿透基质胶的能力。上海益启生物公司干细胞培养的优势。
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