桔汁琼脂(OSA,OrangeSerumAgar)是一种用于饮料中耐酸细菌分离培养的培养基。它的pH值通常控制在5.5±0.2(25℃),这个pH值范围有助于选择性地分离耐酸性的微生物,如乳酸菌,这些微生物是饮料中引起坏的主要微生物之一。**桔汁琼脂的基本成分**包括:-桔汁浸粉:10.0g/L-酵母浸粉:3.0g/L-胰蛋白胨:10.0g/L-葡萄糖:4.0g/L-磷酸氢二钾:2.5g/L-琼脂:17.0g/L**配制方法**:1.称取46.5克桔汁琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌10分钟。5.冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。**用途**:用于饮料中耐酸细菌的分离培养,特别适用于分离引起饮料坏的乳酸菌。**植物乳杆菌在桔汁琼脂上的生长特征**:形成乳白色菌落。**储存条件**:干粉培养基应放置于10-30℃条件下保存,制成培养基后应避光置于2-8℃条件下保存。**注意事项**:避免过分加热该培养基,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。
Preston肉汤基础是一种专门用于培养空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)的选择性增菌培养基。其特点和应用如下:1.**成分**:Preston肉汤基础包含牛肉浸粉、蛋白胨、氯化钠、木酮酸钠、焦亚硫酸钠和硫酸亚铁等成分,这些成分为细菌提供碳氮源、维生素和生长因子,同时维持细菌平衡的渗透压,并提供细菌生长需要的金属离子。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃)。3.**选择性添加剂**:Preston肉汤基础通常需要添加特定的添加剂,如多粘菌素B、利福平和甲氧苄啶,这些添加剂能够抑制其他细菌的生长,而放线菌酮则用于抑制菌生长。4.**制备方法**:称取Preston肉汤基础25.75g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入一支Preston肉汤添加剂和10ml无菌裂解马血,混匀,分装试管,备用。5.**注意事项**:培养基中含少量硫酸亚铁,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**应用**:Preston肉汤基础用于空肠弯曲杆菌的选择性增菌培养,特别适用于从食品和临床样本中分离和增菌空肠弯曲杆菌。兔血清MEE肉汤(MEE Broth)是一种用于肠道菌选择性增菌培养的培养基。如大肠杆菌等肠杆菌科细菌的检测和分离。
DRBC培养基(Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar)是一种用于酵母和霉菌分离培养的培养基。它特别适用于食品中霉菌和酵母菌的计数和分离。**DRBC培养基的基本成分**包括:-酶水解动植物组织:5.0g/L-葡萄糖:10.0g/L-磷酸二氢钾:1.0g/L-硫酸镁:0.5g/L-氯硝铵:0.002g/L-虎红钠盐:0.025g/L-氯霉素:0.1g/L-琼脂:15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2(25℃)。**配制方法**一般是:1.称取31.6克DRBC培养基干粉。2.加入1升蒸馏水或纯化水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌15分钟后备用。**使用方法**:-将灭菌后的培养基冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中。-接种样品后,在25±1℃下进行培养。**培养结果**:-酵母菌和霉菌在DRBC培养基上会形成粉红色的菌落。-大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌在该培养基上会被抑制。**储存条件**:-应在避光、干燥处储存。-保质期通常为三年。**质量控制**:-酿酒酵母ATCC9763在DRBC培养基上生长良好,形成粉红色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢杆菌ATCC6633在该培养基上应被抑制。DRBC培养基是按照ISO21527-1标准生产的,适用于食品和动物饲料中酵母和霉菌的计数。
GC肉汤基础是一种专门用于分离和培养苛养菌,特别是淋球菌和嗜血杆菌等的微生物培养基。其特点主要包括:1.**营养成分**:GC肉汤基础含有胰酪蛋白胨、蛋白胨、玉米淀粉、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和氯化钠等成分,为微生物提供必需的营养。这些成分有助于维持微生物生长所需的能量和合成代谢物质。2.**pH值**:GC肉汤基础的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境。3.**选择性添加剂**:为了提高培养基的选择性,可以添加抗生物质添加剂,如VCN添加剂(V.C.N.Supplement)、VCNT添加剂(V.C.N.T.Supplement)、VCA抑制剂(VCAInhibitor)、VCAT抑制剂(VCATInhibitor)、VancloT添加剂、LincoT添加剂等。4.**营养添加剂**:为了增加培养基的营养性质,可以加入维生素添加剂,如IsoVitaleXEnrichment、SupplementVX或者酵母自溶物添加剂(YeastAutolysateSupplement)。5.**配制方法**:通常需要称取一定量的GC肉汤基础干粉,溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌后,冷却至适当温度,再加入过滤除菌的血红蛋白溶液和GC添加剂,混匀后使用。6.**应用**:GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支。这种培养基具备较高的透明度,便于观察微生物的生长状态和特征。
麦氏(Meclary)琼脂是一种用于菌培养的培养基,其特点包括:1.**配方**:包含酵母浸粉、葡萄糖、氯化钾、醋酸钠和琼脂等成分,pH值控制在6.4±0.2(25℃),为菌提供适宜的生长环境。2.**配制方法**:称取28.5克麦氏琼脂培养基干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行115℃高压灭菌30分钟,备用。3.**用途**:适用于菌培养,特别用于某些霉菌和酵母菌的分离和培养。4.**pH值**:pH值对菌的生长至关重要,麦氏琼脂的pH值适应了某些菌对生长环境的酸碱度要求。5.**选择性**:可能具有一定的选择性,有助于特定类型菌的生长,同时抑制或限制其他微生物的生长。6.**应用**:它常用于实验室中菌的分离、鉴定和计数。通过麦氏琼脂培养基进行菌的分离与鉴定通常包括以下步骤:1.**样品收集**:从疑似有菌存在的环境或物体表面采集样本。2.**样品处理**:将采集的样本进行适当的预处理,如稀释、均质化等。3.**接种**:将处理过的样品接种到麦氏琼脂培养基上。4.**培养**:将接种后的培养基放入恒温培养箱中进行培养,一般温度控制在25℃左右。5.**观察**:在培养过程中定期观察,记录菌落的生长情况、形态特征等。在使用BCPA培养基前,需要进行质量控制,确保培养基的组成、pH值和灭菌条件符合要求,以保证检测的准确性 。氯化钠蔗糖琼脂培养基
在BCPA培养基上,发酵乳糖的细菌菌落通常呈黄色,而非发酵菌落则保持紫色 。SP4培养基
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。SP4培养基