使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
变异链球菌(Streptococcusmutans)是一种在口腔中发现的细菌,与龋齿的形成有关。它是一种革兰阳性球菌,常以成对或短链状排列。在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。对于变异链球菌的培养,通常使用TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板)作为培养基。在这种培养基上,变异链球菌的菌落特征为较小(直径约1mm)、灰白色、凸起、边缘不齐、干燥、有α溶血环。在选择培养基时,需要考虑培养基的pH值、营养成分、氧气需求和抑制剂等因素,以确保目标细菌能够在抑制杂菌的同时良好生长。例如,改良爱德华培养基(Edwardmodifiedmedium)是一种常用的培养基,它含有血液、血清或其它营养成分,适合于培养对营养要求较高的细菌,如链球菌。在实验室中,变异链球菌的培养和鉴定是一个多步骤的过程,包括接种、培养、观察菌落特征、进行生化试验和药敏分析等。通过这些步骤,可以准确地识别和鉴定变异链球菌,从而为临床诊断提供依据。亚利桑那菌琼脂平板海藻糖-脯氨酸培养基被推荐用于稀有放线菌的分离培养基,因为它有助于提高稀有放线菌的出菌率 。
TYC培养基(TryptoneYeastCystineMedium)是一种用于分离口腔中链球菌(Streptococcusspp)的选择性培养基。它的特点包括:1.**成分**:TYC培养基通常包含胰蛋白胨、酵母浸粉、L-胱氨酸、亚硫酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等成分,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**应用**:TYC培养基用于血链球菌的分离,可以添加杆菌肽(0.2U/ml)以增加选择性;也用于制备变形链球菌分离培养基。4.**配制方法**:称取本品98.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后在121℃高压下灭菌15分钟,灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。5.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,可以确保培养基支持目标菌株的生长。6.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处。7.**结果观察**:在TYC培养基上,可以观察到细菌的生长情况,用于进一步的鉴定和分析。TYC培养基因其高选择性和特异性,是检测口腔中链球菌污染的重要工具。
SH培养基(Schenk&HildebrandtMedium)是一种用于植物组织培养的培养基,特别适合于单子叶和双子叶植物细胞的悬浮培养。它含有相对较低的铵盐和较高的硝酸盐,以及丰富的维生素和无机盐,适合许多植物种类的生长。**配方组成**:-硝酸钾(KNO3):2500.00mg/L-磷酸二氢铵(NH4H2PO4):300.00mg/L-氯化钙(CaCl2·2H2O):200.00mg/L-硫酸镁(MgSO4):195.34mg/L-硫酸锰(MnSO4·H2O):10.00mg/L-硼酸(H3BO3):5.00mg/L-碘化钾(KI):1.00mg/L-钼酸钠(Na2MoO4·2H2O):0.10mg/L-硫酸锌(ZnSO4·7H2O):1.00mg/L-硫酸铜(CuSO4·5H2O):0.20mg/L-氯化钴(CoCl2·6H2O):0.10mg/L-硫酸亚铁(FeSO4·7H2O):15.00mg/L-EDTA二钠(Na2EDTA·2H2O):20.00mg/L-肌醇(myo-Inositol):1000.00mg/L-盐酸硫胺素(Thiaminehydrochloride):5.00mg/L-盐酸吡哆醇(Pyridoxinehydrochloride):0.50mg/L-烟酸(Nicotinicacid):5.00mg/L-蔗糖(Sucrose):20000.00mg/L**配制方法**:1.用600ml灭菌后的蒸馏水溶解脱水培养基,用少量蒸馏水冲洗残余培养基粉末。2.轻轻搅动使培养基完全溶解。3.加入所有热稳定添加剂。GC肉汤基础用于致病性奈瑟氏菌的分离,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-N抑菌剂、无菌血红蛋白粉各1支 。
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。TGC液体培养基不仅用于无菌试验,还可用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌总数的测定。MFC琼脂培养皿
细菌保存培养基的基本原理是通过降低细菌的新陈代谢速度,使细菌的生命活动处于半永久性的休眠状态。YPDA琼脂预装培养皿
M-远藤氏防腐培养基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一种用于微生物检测的培养基,主要用于水中大肠菌群的膜过滤法检测。以下是它的一些特点和配制方法:1.**配方**:M-远藤氏防腐培养基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸十二烷基钠、去氧胆酸钠和亚硫酸钠等成分,以及作为指示剂的碱性品红。2.**配制方法**:通常称取一定量的培养基粉末,加入指定量的无水乙醇和蒸馏水,加热至沸腾以帮助溶解。配制好的培养基通常需要在121℃下高压灭菌15分钟。3.**用途**:这种培养基专门用于检测饮用水、废水、乳制品和食品中的大肠菌群,是执行标准方法的一部分,如美国公共卫生协会(APHA)所推荐的方法。4.**贮藏条件**:配制好的培养基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**结果观察**:在M-远藤氏防腐培养基上,乳糖发酵型的大肠杆菌和大肠菌群会产生红色至深红色的菌落,带有金色金属光泽,而非乳糖发酵型微生物则产生无色透明菌落。6.**产品规格**:M-远藤氏防腐培养基通常以250g/瓶的规格出售,并且有较长的保存期限,一般为3年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应避免摄入、吸入和皮肤接触,以确保操作安全。YPDA琼脂预装培养皿