TGE肉汤(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉汤,是一种用于微生物培养的液体培养基。这种培养基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作为指示剂的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉汤(含TTC)的主要用途和特点如下:1.**用途**:TGE肉汤主要用于水、牛奶和乳制品中异养细菌的计数。它适用于细菌总数的测定,也可用于检测乳品中的耐热细菌。2.**成分**:典型的TGE肉汤配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子,葡萄糖作为可发酵的糖类提供能量。3.**pH值**:TGE肉汤的pH值通常调节在7.0±0.2(25℃)。4.**制备方法**:将TGE肉汤的干粉溶解在蒸馏水中,加热煮沸以帮助成分溶解,然后进行高压灭菌。5.**使用**:通常取一定量的培养基加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌,然后用于微生物的培养。6.**指示剂**:TTC作为指示剂,当细菌代谢时,TTC会被还原成红色的三苯基甲烷,从而便于观察细菌的生长情况。7.**保存条件**:未开封的TGE肉汤通常在室温下避光保存,开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。TSA培养皿在冷冻保存过程中,使用保护剂如甘油、血清、糖类等,可以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害 。
TCBS琼脂(ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar)是一种用于分离培养弧菌科细菌,特别是致病性弧菌的选择性培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:-酵母浸粉:5.0g/L-蛋白胨:10.0g/L-硫代硫酸钠:10.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-牛胆粉:5.0g/L-牛胆酸钠:3.0g/L-蔗糖:20.0g/L-氯化钠:10.0g/L-柠檬酸铁:1.0g/L-溴麝香草酚兰:0.04g/L-麝香草酚兰:0.04g/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.6±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、碳源及维生素等生长因子。-氯化钠提供弧菌嗜盐生长的环境,高浓度抑制其他细菌生长。-蔗糖作为可发酵碳源。-枸橼酸钠、高pH值和硫代硫酸钠抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群生长。-硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应,检测细菌产硫化氢。-溴麝香草酚兰和麝香草酚兰作为pH指示剂,细菌利用蔗糖产酸会使得指示剂变黄。-琼脂作为凝固剂。3.**使用方法**:-称取8.9g培养基,溶解于100ml蒸馏水中,煮沸后冷却至50℃,倾入无菌平皿,备用。-注意:无需高压灭菌。4.**不同细菌在TCBS琼脂上的生长特征**:-副溶血性弧菌:蓝绿色斗笠状菌落,H2S阴性。-溶藻弧菌:黄色菌落,H2S阴性。-霍乱弧菌:黄色菌落,H2S阴性。
蜡状芽孢杆菌琼脂基础(TSSB)是一种用于分离和培养蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:蜡状芽孢杆菌琼脂基础的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化钠、苯酚红和琼脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作为可发酵的糖,氯化钠维持渗透压,苯酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黄乳液使用,每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黄乳液。5.**用法**:称取本品43.0g加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入10ml50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**菌落特征**:蜡样芽孢杆菌在TSSB上生长时,菌落通常为微粉红色,周围有淡粉红色沉淀环,这有助于识别蜡样芽孢杆菌。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中。
DTA培养基,也称为葡萄糖胰蛋白胨琼脂,是一种用于分离培养嗜热菌芽孢的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**用途**:DTA培养基主要用于乳制品中嗜热需氧芽孢菌计数,以及嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分为每升培养基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、琼脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培养基的pH值通常调节在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**用法**:称取DTA培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。6.**生长特征**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置55℃需氧培养48小时。回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。8.**储存条件**:DTA培养基应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;贮存期三年。KI培养基主要用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖的能力,以及产生硫化氢的生化反应。TSA培养皿
细菌保存培养基的基本原理是通过降低细菌的新陈代谢速度,使细菌的生命活动处于半永久性的休眠状态。亮绿酚红琼脂平板
甘氨酸培养基是一种专门用于微生物培养的培养基,其特点主要包括:1.**培养基成分**:甘氨酸培养基通常包含布氏肉汤、琼脂和甘氨酸。其中,甘氨酸是该培养基的关键成分,通常添加量为10.0克/升。2.**pH调节**:甘氨酸培养基的pH值一般调节在7.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行灭菌处理,通常采用121℃高压灭菌15分钟。4.**用途**:甘氨酸培养基主要用于弯曲杆菌甘氨酸耐受性试验,如GB标准所规定的。它特别适用于空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的分离和培养,因为这些细菌对甘氨酸有耐受性。在微需氧环境下,于42℃培养48小时后,若培养基表面出现云雾状现象,则为阳性结果。5.**培养特征**:在甘氨酸培养基上,空肠弯曲杆菌能够产生灰色、湿润、平铺的菌落,并且可能带有金色金属光泽。6.**制备方法**:将甘氨酸培养基的粉末成分溶解在适量的蒸馏水中,加热以帮助溶解,然后进行灭菌处理。在冷却至大约50°C时,可以进行倒平板或分装试管。7.**储存条件**:甘氨酸培养基通常需要在干燥、避光的条件下储存,以保持其有效性。亮绿酚红琼脂平板