CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。TSI 培养基可快速鉴别肠道菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖的发酵利用情况,是细菌鉴定的得力助手。改良沙氏琼脂培养基
SSM琼脂是一种强选择性培养基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他选择性抑制剂和缓冲剂。这种培养基的设计旨在分离致病的沙门氏菌和志贺氏菌。以下是SSM琼脂的一些关键特点和制备方法:1.**成分**:SSM琼脂的基础成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,这些提供碳源、氮源、维生素和矿物质。此外,还含有乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、中性红和煌绿等特殊成分,这些成分有助于抑制其他微生物的生长,同时促进目标菌的生长。2.**pH值**:SSM琼脂的pH值通常控制在6.9-7.1之间,以保证微生物的生长环境。3.**制备方法**:首先,称取培养基粉末,加入到适量的蒸馏水中,加热煮沸并不断搅拌直至完全溶解。然后,冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。通常不需要高压灭菌,因为培养基中的某些成分可能在高压灭菌过程中失去活性。4.**应用**:SSM琼脂主要用于沙门氏菌的分离培养,也适用于志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等肠道致病菌的分离培养。在这种培养基上,多数沙门氏菌不发酵乳糖,并产硫化氢,菌落表现为无色透明并有黑色中心。磷酸盐缓冲液(PBS)在 TSI 培养基中,细菌产酸产气及产生硫化氢的反应能直观呈现,为细菌鉴定提供重要依据。
木醋杆菌(Acetobacterxylinum)是一种能够产生细菌纤维素(bacterialcellulose,BC)的微生物,其固体培养基的特点主要包括以下几个方面:1.**碳源**:木醋杆菌的培养基通常需要含有适量的碳源,如葡萄糖、蔗糖等,以提供细菌生长和合成细菌纤维素所需的能量和碳骨架。例如,有研究表明,3%的蔗糖是木醋杆菌HN001的比较好碳源之一。2.**氮源**:氮源对于木醋杆菌的生长和代谢活动至关重要。常用的氮源包括蛋白胨、酵母膏、硫酸铵、氯化铵、乙酸铵或柠檬酸铵等。研究表明,0.1%的乙酸铵或柠檬酸铵是木醋杆菌合成细菌纤维素的比较好氮源。3.**无机盐**:包括磷酸盐和镁盐等,这些无机盐对于细菌的生长和纤维素的合成都有重要作用。例如,0.1%的Na2HPO4和0.025%的MgSO4是木醋杆菌培养基中的重要成分。4.**有机酸**:有机酸如柠檬酸和乙酸等,不仅作为碳源,还能调节培养基的pH值,对木醋杆菌的生长和纤维素的合成有促进作用。研究表明,0.1%的乙酸能够促进木醋杆菌产生纤维素。5.**pH值**:木醋杆菌的生长和纤维素的合成对pH值有一定的要求,通常在pH5.0至6.8之间。有研究表明,pH5.0是木醋杆菌HN001的比较好生长条件之一。
DRBC培养基(Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar)是一种用于酵母和霉菌分离培养的培养基。它特别适用于食品中霉菌和酵母菌的计数和分离。**DRBC培养基的基本成分**包括:-酶水解动植物组织:5.0g/L-葡萄糖:10.0g/L-磷酸二氢钾:1.0g/L-硫酸镁:0.5g/L-氯硝铵:0.002g/L-虎红钠盐:0.025g/L-氯霉素:0.1g/L-琼脂:15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2(25℃)。**配制方法**一般是:1.称取31.6克DRBC培养基干粉。2.加入1升蒸馏水或纯化水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌15分钟后备用。**使用方法**:-将灭菌后的培养基冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中。-接种样品后,在25±1℃下进行培养。**培养结果**:-酵母菌和霉菌在DRBC培养基上会形成粉红色的菌落。-大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌在该培养基上会被抑制。**储存条件**:-应在避光、干燥处储存。-保质期通常为三年。**质量控制**:-酿酒酵母ATCC9763在DRBC培养基上生长良好,形成粉红色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢杆菌ATCC6633在该培养基上应被抑制。DRBC培养基是按照ISO21527-1标准生产的,适用于食品和动物饲料中酵母和霉菌的计数。溴甲酚紫乳糖琼脂(简称BCPA)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定大肠菌群。
Leeming-Notman培养基基础是一种专门用于培养马拉色菌属(Malassezia)等亲脂性菌的微生物培养基。其特点主要包括:1.**成分**:Leeming-Notman培养基基础包含蛋白胨、葡萄糖、酵母膏粉、牛胆盐、甘油、单硬脂酸甘油酯(GMS)、吐温60(Tween60)、全脂牛奶粉和氯霉素等成分。这些成分为马拉色菌提供必需的营养和生长环境。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在5.6±0.2(25℃)。3.**添加剂**:为了促进马拉色菌的生长,每80ml培养基基础需要添加1支S0614(马拉色菌培养基添加剂)和1支S4101(橄榄油1.6ml)。4.**制备方法**:称取本品32.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸溶解,分装三角瓶,每80ml加入1支S4101(橄榄油1.6ml),121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右,无菌操作每80ml添加1支S0614,摇匀,备用。5.**特殊说明**:由于含有奶粉等物质,Leeming-Notman培养基基础存在大量不溶物。同时,由于含有吐温,培养基湿润且易结块。6.**应用**:Leeming-Notman培养基基础主要用于马拉色菌的培养,该培养基的改良版本也被用于提高马拉色菌的培养效率,并在实际应用中取得了良好的效果。
去氧胆酸钠的存在使得DC培养基对革兰氏阳性菌具有抑制作用,而对大肠菌群等革兰氏阴性菌则相对促进其生长。改良沙氏琼脂培养基
尿素培养基是一种用于检测细菌是否具有尿素酶活性的微生物培养基。其特点主要包括:1.**成分**:尿素培养基的主要成分包括蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、尿素、葡萄糖、酚红指示剂和琼脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾作为缓冲剂;尿素作为底物检测细菌是否具有尿素酶活性;酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境和酶活性的发挥。3.**尿素酶检测**:某些细菌能产生尿素酶,将尿素分解产生氨,使培养基变为碱性,酚红指示剂在pH升高时变色(通常为粉红色),通过观察颜色变化来判断细菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装。高压灭菌后,冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,pH应为7.2±0.1。分装于灭菌试管内,放成斜面备用。5.**应用**:尿素培养基主要用于鉴定革兰氏阴性菌中的尿素酶活性,如用于肠杆菌科细菌的鉴定,例如大肠埃希菌和奇异变形杆菌等细菌具有尿素酶活性,而鲍曼不动杆菌则不具备尿素酶活性。改良沙氏琼脂培养基