牛津琼脂(OXA)基础是一种用于分离培养李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化钠、七叶苷、柠檬酸铁铵、氯化锂和琼脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特点**:1.**选择性**:含有氯化锂和抗生物质添加剂(如多粘菌素E、放线菌酮、吖啶黄素、头孢双硫唑甲氧、磷霉素),这些成分能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌的生长,特别是非李斯特氏菌。2.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中李斯特氏菌的选择性分离培养,符合ISO和SN标准。3.**配制方法**:通常称取5.85g的OXA基础粉末,溶解在100mL蒸馏水中,高压灭菌15分钟后冷却至50℃,再加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌平皿备用。4.**结果观察**:李斯特氏菌在OXA培养基上生长时,会形成黑色菌落,并且菌落周围可能有黑色环。牛津琼脂基础因其高选择性和特异性,是检测食品和水样本中李斯特氏菌污染的重要工具。CVT琼脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、结晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和琼脂等成分。TCBS琼脂培养皿
轻唾琼脂培养基(MSA)基础是一种用于分离培养轻型唾液链球菌的选择性培养基。以下是使用轻唾琼脂培养基(MSA)进行细菌分离和鉴定的步骤:1.**制备培养基**:-称取90gMSA粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-加热煮沸至完全溶解。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃,加入1mL无菌1%亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。2.**接种样本**:-将待测样本如咽拭子、尿液或其他临床样本进行适当的稀释。-将稀释后的样本均匀地涂布在MSA平板上。3.**培养**:-将接种后的培养皿置于35-37°C的培养箱中培养18-48小时。4.**观察菌落生长**:-观察培养基上生长的菌落,注意菌落的颜色、形态和大小。-肠球菌在MSA上通常形成蓝色-黑色的菌落。5.**挑选可疑菌落**:-挑取可疑的菌落进行纯化培养。6.**进行生化试验**:-对纯化后的菌株进行一系列的生化试验,如糖发酵试验、CAMP试验、胆汁七叶苷试验等,以进一步鉴定菌种。7.**结果分析**:-根据菌落特征和生化试验结果,结合菌株的形态学特征,进行菌种的鉴定。8.**报告结果**:-将鉴定结果整理成报告,包括菌株的名称、数量和相关的生化特性。MFC琼脂预装培养皿CASO AGAR+20g/L尿素是一种用于巴氏芽孢杆菌的培养基,其成分包括酪蛋白胨、氯化钠和琼脂,pH值为7.3 。
NGKG琼脂基础是一种用于食品中蜡样芽孢杆菌分离培养的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:NGKG琼脂基础的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、甘氨酸、苯酚红和琼脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;甘氨酸提供氮源;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。2.**pH调节**:NGKG琼脂基础的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加物**:在冷却至50℃左右时,需要加入20%卵黄液100mL(卵黄液制备:取无菌卵黄液20mL,生理盐水80mL,混匀)。卵黄液提供卵磷脂,产卵磷脂酶的细菌可水解卵磷脂,使其菌落周围形成一个白色的沉淀环。5.**抗生物质**:每200mL培养基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革兰氏阴性细菌生长。6.**用途**:NGKG琼脂基础主要用于食品中蜡样芽孢杆菌的分离培养。7.**培养特征**:在30℃±1℃需氧培养18-24小时后,典型的蜡样芽孢杆菌在NGKG琼脂基础上表现为浅红色菌落,边缘不规则,有卵磷脂沉淀环。8.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些主要特点和使用方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-牛肉浸粉:5.0g/L-氯化钠:5.0g/L-无水亚硫酸钠:3.0g/L-十二烷基硫酸钠:0.5g/L-猪胆粉:5.0g/L-利凡诺:0.03g/L-庆大霉素:500U/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.5±0.2(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-十二烷基硫酸钠、猪胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉培养基,加入1L蒸馏水或去离子水,加热煮沸充分溶解,冷却至50℃左右,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。4.**使用方法**:-从冷藏柜中取出平板皿,并恢复至室温。-将包装整体送入试验地点。-试验或接种。-将平板从洁净室取出,按规定的温度和时间倒置培养。-观察、计数。在DCR培养基中,添加不同的植物素,如2,4-D、6-BA、KT等,可以调节植物细胞的生长和分化。
蜡状芽孢杆菌琼脂基础(TSSB)是一种用于分离和培养蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:蜡状芽孢杆菌琼脂基础的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化钠、苯酚红和琼脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作为可发酵的糖,氯化钠维持渗透压,苯酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黄乳液使用,每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黄乳液。5.**用法**:称取本品43.0g加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入10ml50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**菌落特征**:蜡样芽孢杆菌在TSSB上生长时,菌落通常为微粉红色,周围有淡粉红色沉淀环,这有助于识别蜡样芽孢杆菌。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等,培养后观察菌落生长。NA+头孢菌素酶平板
低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。TCBS琼脂培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。