T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。

一、产品特点(一)低 ROX 参考染料设计Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 专为基于探针的 qPCR 实验设计,其低浓度的 ROX 参考染料是其特点。在多色荧光 qPCR 实验中,ROX 作为被动参考染料用于校正孔间荧光信号的差异。然而,过高的 ROX 浓度可能会干扰实验结果的准确性,导致背景荧光过高或影响其他荧光信号的检测灵敏度。该产品通过精确调控 ROX 浓度,使其在保证校正功能的同时,降低对实验结果的干扰,为多色荧光检测提供了稳定可靠的背景环境。(二)2×预混体系作为一款 2×浓度的预混液,Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 在使用时只需与模板和引物等反应组分等体积混合即可进行反应,极大地简化了实验操作流程。这种预混体系不仅节省了实验时间,还减少了因手动配制反应体系而引入的误差,提高了实验的重复性和准确性。同时,其优化的配方确保了反应体系在不同实验条件下的稳定性和兼容性,无论是对常规的基因表达分析,还是对复杂样本的病原体检测,都能提供可靠的性能保障。Recombinant Human Complement Factor D/CFD (His Tag)Endo H 的活性受 pH 值的强烈影响,通常在酸性条件下表现出好的活性,一般合适 pH 范围在 5.0-6.0 左右。

Taq DNA聚合酶:分子生物学的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus aquaticus中分离得到的耐热性DNA聚合酶,因其独特的耐高温特性和高效的DNA合成能力,成为分子生物学领域不可或缺的工具。该酶在PCR(聚合酶链式反应)技术中发挥着重要作用,极大地推动了基因扩增、测序和诊断技术的发展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,这使得它在DNA合成过程中能够快速延伸引物,同时在PCR产物的3'端添加一个突出的A碱基,便于后续的克隆操作。此外,Taq酶的耐热性使其能够在PCR的高温变性步骤中保持稳定,从而实现高效的循环扩增。近年来,科学家们通过对Taq DNA聚合酶的改造和优化,开发出多种突变体,以满足不同的实验需求。例如,Klentaq1突变体具有更高的耐热性和保真性,适用于长片段PCR扩增。此外,Taq酶的5'外切酶活性还被用于开发新型的多重PCR检测技术,如“MeltArray”技术,实现了在单次反应中检测多个靶点。Taq DNA聚合酶的发现和应用不仅极大地简化了DNA扩增的流程,还为基因诊断、遗传病检测和个性化医疗等领域提供了强大的技术支持。
dNTP Mix(脱氧核苷三磷酸混合物)是分子生物学实验中不可或缺的基础试剂,广泛应用于PCR、DNA测序、克隆以及体外DNA合成等领域。dNTP Mix (25 mM each) 提供了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dTTP、dCTP和dGTP),每种浓度均为25 mM,能够满足多种实验需求。产品特点dNTP Mix (25 mM each) 是一种高浓度的即用型试剂,包含四种脱氧核苷三磷酸,每种浓度均为25 mM。这种高浓度设计使其能够兼容多种实验体系,无论是常规PCR、高通量测序还是复杂的基因编辑实验,都能满足需求。此外,该试剂经过严格的质量控制,确保纯度和稳定性,能够为DNA合成提供高质量的原料保障。dNTP Mix中的四种核苷酸是DNA聚合酶合成DNA链时的关键底物,其纯度和浓度直接影响DNA合成的效率和准确性。高纯度的dNTP Mix能够减少杂质干扰,降低错误掺入率,从而提高实验的成功率和重复性。应用场景dNTP Mix是分子生物学实验的重要试剂,广泛应用于以下领域:PCR反应:dNTP Mix是PCR反应的关键组分之一,为DNA链的延伸提供了必要的核苷酸。在常规PCR、多重PCR和实时定量PCR中,dNTP Mix的纯度和浓度直接影响扩增效率和特异性。Taq PCR Master Mix (2×) (Without Dye) 是一种即用型的2倍浓度预混液,广泛应用于常规PCR扩增。

dUTP(脱氧尿苷三磷酸)是一种特殊的核苷酸,其结构与dTTP(脱氧胸苷三磷酸)相似,但在碱基部分含有尿嘧啶而非胸腺嘧啶。dUTP在分子生物学中具有独特的应用价值,尤其是在DNA合成、PCR反应以及基于尿嘧啶的标记和检测中。产品特点dUTP Solution (100 mM) 是一种高纯度的即用型溶液,浓度为100 mM,能够满足多种实验需求。与传统的dNTP(如dATP、dTTP、dCTP和dGTP)不同,dUTP中的尿嘧啶可以被特定酶识别和作用,例如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。这一特性使其在某些实验中具有不可替代的作用。dUTP溶液经过严格的质量控制,确保其纯度和稳定性。其高浓度设计便于实验人员根据具体需求进行稀释和使用,同时减少了试剂添加量,降低了污染风险。应用场景dUTP在分子生物学中具有多种独特的应用:PCR反应中的热启动:dUTP常用于热启动PCR技术中,通过引入尿嘧啶标记的引物,利用UDG酶在PCR反应前降解引物,从而防止非特异性扩增。DNA标记与检测:dUTP可用于DNA标记,通过将尿嘧啶引入DNA链,后续可通过UDG酶或荧光标记的抗尿嘧啶抗体进行检测,实现对特定DNA片段的标记和追踪。Phusion DNA Polymerase广泛应用于分子生物学研究中,尤其是在需要高保真度和快速扩增的场景中。T4 DNA连接酶
无论是基础研究还是应用开发,它都能满足多样化的实验需求,助力科学研究的顺利开展。Recombinant Human EMMPRIN/CD147 (His Tag)
Ultra-Long DNA Polymerase 是一种专为超长片段扩增设计的耐热DNA聚合酶,具有链延伸能力和高保真性,能够高效扩增长达数十千碱基(kb)的DNA片段。这种聚合酶在基因组学研究中具有重要意义,尤其是在复杂基因组的完整组装和超长测序领域。特点Ultra-Long DNA Polymerase 的重要优势在于其超长扩增能力。它能够在单次反应中合成超过100 kb的DNA片段,甚至在某些优化条件下,比较大读长可达数百万碱基。这种能力使其在填补基因组组装中的缺口(gap)和实现端粒到端粒(T2T)基因组组装方面表现出色。此外,Ultra-Long DNA Polymerase 具有高保真性,能够降低扩增过程中的错误率,这对于需要高精度的基因组学研究至关重要。它还具备3'-5'外切酶活性,能够进一步提高扩增产物的准确性和可靠性。应用Ultra-Long DNA Polymerase 在多个领域展现出巨大潜力。例如,在植物基因组学中,它被用于优化超长DNA片段的提取和扩增,成功实现了多个植物物种的高质量T2T基因组组装。通过结合牛津纳米孔(Oxford Nanopore)测序技术,Ultra-Long DNA Polymerase 能够生成超长读长的测序数据,明显提高了基因组组装的完整性和准确性。
NTPSetSolution(脱氧核糖核苷三磷酸溶液套装)是分子生物学实验中不可或缺的基础试剂,包含四种高纯度的dNTP(dATP、dCTP、dTTP和dGTP),每种浓度均为100mM。这种高浓度的溶液套装为DNA合成提供了高质量的原料,广泛应用于PCR、DNA测序、克隆以及体外DNA合成等领域。产品特点dNTPSetSolution(100mMeach)提供了四种脱氧核苷三磷酸,每种浓度均为100mM,能够满足多种实验需求。这种高浓度设计不仅减少了实验中试剂的添加量,还降低了污染风险,同时便于实验人员根据具体需求进行稀释和使用。此外,该套装经过严格的质量控制,确保纯度和稳定性,能够为DNA...