草酸盐嗜氨菌

MB培养基基础（Marine Broth Base）是一种专为海洋细菌设计的富营养液体培养基，由蛋白胨、酵母粉及多种无机盐组成，pH 7.2–7.6，渗透压与海水相当。配方中氯化钠浓度约2–3%，并补充镁、钾、钙等海水中主要离子，可瞬时启动依赖高盐环境的嗜盐菌与耐盐菌，缩短延滞期。实验室常规做法是将培养基干粉溶解于蒸馏水后，补加陈海水或人工海盐，即可恢复接近自然海水的离子谱，使挑剔的海洋放线菌、弧菌、假单胞菌等迅速进入对数生长，用于后续分离、保藏或活性物质筛选。由于海洋微生物常产色素、抗生物质及胞外多糖，MB培养基的高营养特性可充分展现这些次级代谢潜能：弧菌在28℃、180 r/min振荡培养12小时，菌浓即可达10⁹ CFU/mL，菌液呈乳白或淡粉；某些Planococcus则分泌墨蓝色素，使整瓶培养液变为靛蓝，成为天然色素研究的理想起点。若需固体培养，只需补加1.5%琼脂，即成MBA平板，可在表面涂布沉积物悬液，28℃培养2–3天，挑取形态各异的单菌落进行16S rDNA鉴定，流程简洁高效。在质量控制方面，MB培养基需用人工海水或陈海水配制，切忌直接使用自来水，以免钙镁离子不足或氯残留抑制菌体；灭菌后若出现沉淀，多为镁盐析出，可50℃水浴复溶，不影响使用。

酸快生芽孢杆菌（Bacillus acidiceler）是2014年才被正式命名的芽孢杆菌新成员，却已在绿色农业中跑出“加速度”。菌株HS3由花生根际分离，耐酸、耐旱、耐温，pH 5.5仍能快速萌发；其芽孢可抗紫外、耐干燥，货架期长达24个月，为商品化奠定基础。HS3的“三板斧”让土壤瞬间启动：①产IAA 45.8 mg/L，诱导玉米、花生根系激增30%以上；②溶有机磷2.9 mg/L、解钾19.9 mg/L，把固定态磷钾变成养分；③分泌蛋白酶与脂肽，抑制番茄青枯、辣椒疫霉，病指下降四成。田间数据显示，在花生-玉米间作体系下，每亩滴灌200 mL菌液（10^8 CFU/mL），花生侧磷、钾分别提高24%、53%，秕果率降54%，增产9.9%；玉米侧IAA提升68%，秃顶缩短27%，增产18.6%，相当于少施25 kg复合肥仍多打粮。工业端，菌株CNBG-PGPR-17 24 h内可把无机磷溶出277 mg/kg，并产乳酸0.27 kg/L，发酵液pH直降1单位，既当“生物酸化剂”又当“液体磷肥”，已用于蓝莓基质，使可溶性蛋白、花青素分别增加17.7%、10.5%，果实糖酸比更协调。未来，随着耐酸、耐盐基因被进一步解码，酸快生芽孢杆菌有望走进南方红壤、北方盐碱地，乃至矿区复垦，用一把“酸”钥匙打开贫瘠土壤的肥力之门，为“减磷增效”提供可持续的微生物方案。

威氏芽孢杆菌是土壤里低调的“多面手”。它先以杆状活菌在根际游弋，一遇干旱、高温便迅速缩成厚壁芽孢，可耐沸水煮十分钟、紫外曝晒两小时，仍能在十年后遇水萌发。植保学家把它当“杀菌剂”：芽孢复苏后分泌表面活性素、伊枯草菌素，像微型剪刀刺破病原菌膜，对白绢、根腐、灰霉的抑制率超七成；同时诱导植物开启系统抗性，番茄未染病就先“武装”叶片。温室试验显示，每亩用两百克菌粉拌基质，黄瓜枯萎率降四成，农药少打一半，果实仍青亮。更妙的是，它能分解有机磷长链，释放正磷酸供作物吸收，相当于给土壤配了“微肥”。东北大豆连作田因它缓解“磷饥饿”，亩产增8%。如今，生物公司以玉米浆发酵罐培养，把芽孢制成可湿性粉剂，拌种、滴灌皆宜，保质期两年，运输不必冷链。科学家还在其基因组里插入耐盐基因，让它在西北盐碱地也能萌发，为弃荒滩涂夺回粮田。小小威氏芽孢杆菌，用微米之躯守护绿色丰收，让农药瓶少一个，饭碗多一粒。在农业领域，特基拉芽孢杆菌表现出广谱抑菌与促生双重功效。

堀越氏芽孢杆菌（Bacillus horikoshii）是20世纪90年代由日本科学家堀越等从碱性温泉沉积物中分离出的嗜碱菌，也是国际公认的模式菌株（ATCC 700161）[ ^82^ ][ ^84^ ]。菌体杆状、革兰氏阳性，可形成椭圆芽孢，更适pH 8.5–9.5、温度30–37 ℃，在Na₂CO₃浓度50 g L⁻¹的极端环境中仍能正常代谢，被称为“天然碱性细胞工厂”。一、耐碱机制基因组编码多拷贝Na⁺/H⁺逆向转运蛋白（mnh、nhaC）和碳酸酐酶，可将胞内多余Na⁺排出，并将CO₃²⁻转化为HCO₃⁻，维持胞内pH稳态；细胞壁肽聚糖含高比例二氨基庚二酸，增强膜稳定性，为高温高碱酶的高效表达提供平台。二、工业酶潜力其耐碱淀粉酶、普鲁兰酶更适pH 9–10，90 ℃半衰期>2 h，已用于淀粉糖化“一步法”，可省略传统工艺中的中和环节，节能15 %；耐碱蛋白酶在洗涤剂中可去除血渍、奶渍，低温活性优于市场同类酶20 %。三、农业与环境应用菌株P1具备“溶磷-钝化重金属”双重功能：在pH 9、Cd²⁺ 50 mg kg⁻¹条件下，仍可将难溶磷酸钙转化为磷277 mg kg⁻¹，同时胞外多糖吸附Cd²⁺，使水稻籽粒镉含量下降35 %，产量提高18 %。

侄子根瘤菌是土壤里的微型氮厂，遇豆科根毛即附，分泌信号，诱根内陷成瘤。草酸盐嗜氨菌

无机磷细菌培养基（不含琼脂）是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”：磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在，不提供任何磷；葡萄糖或甘露醇担任碳源，硫酸铵为氮源，并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液，pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌，方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻，供自身同化并释放到液相中，使原本乳白的悬浊液逐渐澄清，上清有效磷浓度上升，实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效：250 mL三角瓶装50 mL培养液，接入土壤或根际稀释液，28℃、170 r/min振荡培养5–7天；每24 h取样离心，钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度，绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹，pH降至4.5以下，溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较，可改用96深孔板，同步测定OD₆₀₀与可溶性磷，计算单位生物量溶磷效率，快速锁定优良菌株。质量控制要点：灭菌后磷酸三钙易沉降，使用前需涡旋或磁力搅拌重悬；背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹，避免假阳性。储存过程若出现絮凝，多为钙-蛋白复合物，可超声打散，不影响活性。草酸盐嗜氨菌