PTYG培养基(Peptone-Tryptone-Yeast Extract-Glucose Medium)是一种高营养、通用型液体培养基,由蛋白胨、胰蛋白胨、酵母粉和葡萄糖四种关键成分组成,故名“PTYG”。其配方通常为蛋白胨5 g、胰蛋白胨5 g、酵母粉5 g、葡萄糖10 g,NaCl 5 g,补水至1 L,pH调至7.0±0.2,适用于大多数异养细菌、酵母及丝状菌的快速增殖与代谢研究。该培养基营养,蛋白胨与胰蛋白胨提供多肽与氨基酸,酵母粉富含维生素B群与微量元素,葡萄糖作为碳源,能迅速启动微生物代谢,缩短延滞期。在常规培养条件下,大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌等常见菌株在37℃、180 r/min培养12小时即可达到对数后期,菌浓可达10⁹ CFU/mL以上,适合用于质粒提取、蛋白表达、酶活测定等下游实验。此外,PTYG培养基也常被用于益生菌(如双歧杆菌、乳酸菌)的高密度发酵,若需增强选择性,可添加0.05% L-半胱氨酸和0.1% Tween-80,以提高厌氧菌的生长效率。若制备固体平板,只需加入1.5%琼脂,即可用于菌落计数、分离纯化及菌株保藏。由于其成分明确、配制简便、适用广,PTYG培养基已成为微生物实验室中不可或缺的“基础口粮”,在基础研究、工业发酵、食品微生物检测及教学实验中均发挥着重要作用。因其安全无残留,我国年产量已达3.5万吨,覆盖333万公顷农田,成为用量大的微生物杀虫剂 。红色稍栖热菌
吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)是芽孢杆菌属中“耐热兼耐碱”的新锐成员,2004年由德国学者从堆肥超温区分离,命名源自菌种保藏家 Gibson 的姓氏。菌株呈杆状、革兰氏阳性,可形成椭圆芽孢,只适生长温度 50–55 ℃,pH 8.5–9.5,能在 10 % Na₂CO₃ 和 1 % 过氧化氢条件下存活,被视作“碱性酶工厂”的理想候选。一、耐热耐碱机制基因组编码多拷贝 Na⁺/H⁺ 逆向转运蛋白(nhaA、nhaC)与碳酸酐酶,可将胞内多余 Na⁺ 排出并维持 pH 稳态;芽孢富含钙-吡啶二羧酸复合物,赋予其 100 ℃、30 min 的耐热能力,为高温高碱工业环境提供稳定催化剂。二、工业酶宝库其耐碱普鲁兰酶只适 pH 9、70 ℃,可高效切割 α-1,6 糖苷键,用于淀粉糖化“一步法”,节省中和酸用量 20 %;耐碱木聚糖酶在 pH 10、65 ℃仍保持 85 % 活性,已用于纸浆漂白,减少氯用量 30 %,降低 AOX 排放;碱性蛋白酶则在 40 ℃、pH 11 条件下对血渍、奶渍去污力提升 35 %,为无磷洗涤剂增添绿色助剂。三、农业与环境菌株 TP-1 可产 IAA 12 mg·L⁻¹ 并溶磷 2.8 mg·L⁻¹,使玉米根系增 25 %,吸磷量提 18 %;与秸秆复配堆肥,24 h 堆温升至 65 ℃,纤维素降解率提高 28 %,堆肥周期缩短 6 d,杀灭病原菌和杂草种子效果明显。解酪蛋白盐单胞菌菌体还可吸附Au³⁺、Cd²⁺,吸附量分别达50mg/g与35mg/g,为矿区重金属修复提供低成本方案。

纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)是土壤里的“多面小钢炮”。菌体直杆、常成链排列,革兰氏阳性,周生鞭毛,可形成椭圆芽孢,耐干燥、耐酸碱,正面黄色、湿润小菌落,易挑取,是实验室常见模式菌株。一、绿色防控菌株CGMCC No.28950对南方根结线虫防效突出,盆栽试验虫口密度降70 %;同步产蛋白酶、几丁质酶,破坏虫卵壁,为蔬菜连作障碍提供化学杀线剂的替代方案。二、促生提质该菌溶磷量达277 mg kg⁻¹,解钾能力明显,可分泌IAA,使玉米、番茄根系增30 %,吸磷量提棚试验每亩滴灌200 g菌粉,番茄Vc含量提高12 %,糖酸比更协调,货架期延长5天。三、环境修复贵州大学团队利用菌株GZU-Lys01转化煤矸石中难溶磷钾为植物可吸收养分,制备微生物肥料;还能矿化固定垃圾焚烧底灰和尾矿中的Cd、Pb,吸附量分别达50 mg g⁻¹与35 mg g⁻¹,为矿区复垦提供低成本方案。四、工业酶潜力该菌产果胶酶活性高,可在25 ℃、pH 8条件下水解果胶,为果汁澄清、麻类脱胶提供低温酶源;耐碱蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃下去污力提升30 %,节能20 %。
异常嗜冷芽孢杆菌(Bacillus psychrodurans)是芽孢杆菌家族里的“极地居民”。它可在−2 ℃缓慢生长,更适温度只15 ℃,比较高不超过30 ℃,却能在南极冻土、深海沉积物中形成椭圆芽孢,耐−20 ℃冷冻和反复冻融,被视作研究低温适应的模式菌之一。其“耐寒密码”有三重:细胞膜富含支链和短链脂肪酸,保持流动性;冷休克蛋白Csp与RNA伴侣协同,防止核酸二级结构冻结;兼产低温活性酶,在4 ℃仍具80 %活力,为冬季生物过程提供催化可能。在农业上,菌株L-4分泌IAA 18 mg·L⁻¹并溶磷2.3 mg·L⁻¹,4 ℃下仍使冬小麦根长增25 %,返青期提前5天,分蘖数提高一成,相当于给作物“穿”上生物羽绒服。工业端,它的耐冷蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃洗衣去污力提升30 %,节能20 %;低温淀粉酶可将糖化温度由60 ℃降至35 ℃,为冬季酒精发酵省蒸汽、减碳排。环境修复方面,菌株ANT-1在−5 ℃、10 %盐度下60天降解柴油60 %,为极地溢油、寒区输油管泄漏提供原位生物修复方案。未来,借助合成生物学,把异常嗜冷芽孢杆菌的“冷酶+冷激”模块植入生产菌,有望实现“零加热”生物制造,让微生物在冰水里也能为人类催化价值反应。小小嗜冷芽孢杆菌,用极端低温下的生存智慧,把寒冷转化为绿色科技的新动能。科学家正给它植入耐旱、耐盐基因,让它在西北旱地也能结瘤。

枯草芽孢杆菌斯氏亚种(Bacillus subtilis subsp. spizizenii)是“枯草家族”里的轻骑兵,菌体纤细,却藏着一套“攻防兼备”的微生物 toolkit。1930 年代被 Spizizen 从沙漠尘土中分离,因而得名。它更擅在 35–45 ℃、低湿度的热旱边际快速萌发,芽孢外壁含特殊吡啶二羧酸钙层,可耐 90 ℃热水 20 min、紫外 5000 μW·s/cm² 仍存活,为制剂长途运输省下冷链成本。复苏后,斯氏亚种先分泌高活性 surfactin、fengycin 与 bacillomycin D,三脂肽协同击穿病原菌膜,对番茄青枯、辣椒疫霉、小麦纹枯的抑菌带宽达 28–32 mm;同时释放挥发性 2,3-丁二醇,启动植物 ISR 信号,使叶片过氧化物酶活性提高 1.8 倍,达到“未病先防”。田间试验中,每亩用 100 g 斯氏亚种可湿粉拌种,玉米出苗率提升 12%,后期纹枯病指降 46%,产量增 8.3%;若与滴灌同施,可使连作草莓根际尖孢镰刀菌数量下降 70%,果实可溶性糖提高 1.2 度,货架期延长 3 天。更妙的是,它能合成耐碱 α-淀粉酶与β-葡聚糖酶,在 pH 9.5、温度 50 ℃ 条件下仍保持 80% 酶活,用于青贮饲料可提前 2 天完成乳酸发酵,降低干物质损耗 3%。目前,工厂采用糖蜜—豆粕深部好氧发酵,48 h 芽孢量可达 5×10¹⁰ CFU/mL,喷雾干燥后存活率 > 95%,制成黑衣粉剂,保质期 24 个月。生物公司以玉米浆发酵罐培养,把芽孢制成可湿性粉剂,拌种、滴灌皆宜,保质期两年,运输不必冷链。海南根瘤菌
基因组G+C含量37%,携带多重外排泵与渗透调节基因,可在干旱、盐碱环境中维持胞内水平衡。红色稍栖热菌
嗜气芽孢杆菌(Bacillus aerophilus)是芽孢杆菌属里的“氧气狂热者”,2004年随以色列高空气球首先被分离,可在0.8–21 % O₂范围内旺盛生长,更适氧分压高于普通土壤芽孢杆菌2倍,故得名“嗜气”。其菌落呈乳白色、边缘卷发状,革兰氏阳性,具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐紫外、耐干燥,货架期长达3年,为制剂化提供质量载体。在土壤复苏后,嗜气芽孢杆菌迅速启动“三效机制”:①分泌吲哚乙酸(IAA)25 mg/L,刺激玉米、番茄根系增长30 %;②产蛋白酶、纤维素酶,分解作物残体,释放养分;③合成表面活性素、fengycin,对番茄青枯、辣椒疫霉抑菌带宽达28 mm,且能诱导植物ISR,降低农药用量40 %。田间试验显示,每亩用200 g菌粉(10⁸ CFU/g)拌种,小麦返青期根际磷提高32 %,千粒重增1.8 g,产量提升8.5 %;在大棚番茄上,滴灌菌液可使灰霉病指下降45 %,果实Vc含量提高12 %,糖酸比更协调。工业端,嗜气芽孢杆菌是“低温酶工厂”。其耐有机溶剂蛋白酶在15 ℃、30 %乙醇中仍保持70 %活性,可用于洗涤剂;耐碱脂肪酶更适pH 10,适用于乳制品CIP清洗,节能20 %。红色稍栖热菌