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牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤:1.**DNA载体连接**:-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接,特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**:-在NGS建库中,牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育,以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**:-**质粒解旋**:将超螺旋质粒DNA与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现质粒的解旋。-**接头连接**:将接头A(含CCCTT序列)和接头B(含5’OH)与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现接头的连接。4.**注意事项**:-双链接头A通常5’端做NH2封闭修饰,以防止自连接;接头A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降。-双链接头B的5’端必须包含-OH。-由于该酶应用广,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用,并根据具体文献进行调整。position:absolute;left:383px;top:209px;">使用 Tn5 转座酶可以保证 DNA的 片段化的质量,同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低,能够为后续的实验。Mouse Fractalkine/CX3CL1

Mouse Fractalkine/CX3CL1,标准物质

产品特点50×ROXReferenceDye的主要成分是高纯度的5-ROX甘氨酸,其浓度为25µM,以50倍浓缩的形式提供。这种染料的荧光强度在PCR过程中保持稳定,不会因扩增反应而发生变化,因此可以作为理想的内部参考信号。其激发波长为575nm,发射波长为602nm,与多数qPCR仪器的光学系统兼容。此外,ROXReferenceDye具有良好的化学稳定性,能够在-20℃避光保存长达2年,短期使用时可在4℃保存。这种稳定性使其在实验中能够提供一致的荧光信号,减少因试剂变质导致的实验误差。性能优势校正孔间误差:qPCR实验中,由于加样量、孔位置、试管壁厚度等因素,不同孔之间的荧光信号可能存在差异。50×ROXReferenceDye能够通过校正这些非PCR相关的变化,显著提高定量的精确度。提高数据重现性:通过使用ROX染料对数据进行归一化处理,实验人员可以在较少的重复实验中获得更精确的结果,从而节省时间和资源。适用于多种仪器:50×ROXReferenceDye兼容多种主流qPCR仪器,如ABI5700、7000、Recombinant Rhesus macaque CTGF/CCN2 Protein,His Tag可以利用现有的计算工具,如CRISPR design tools,预测gRNA的活性和特异性,以辅助实验设计 。

Mouse Fractalkine/CX3CL1,标准物质

SETD7(SETdomaincontaining7)是依赖S-腺苷甲硫氨酸的组蛋白H3K4特异性甲基转移酶,亦催化p53、TAF10等非组蛋白底物,在干细胞维持、代谢重编程及病抑制网络中扮演“表观开关”角色。本品以昆虫细胞-杆状病毒系统表达全长催化域(aa1-366),保留天然折叠与辅因子结合口袋;N端6×His标签经Ni²⁺-NTA、离子交换两步纯化,SDS-PAGE与SEC-MALS显示单体均一,纯度≥98%;内素<0.05EU/μg,适配体外酶活、晶体学与细胞转染。功能验证:在标准甲基化体系中,100nMSETD7可在30min内将H3(1-21)肽段K4位单甲基化提升至85%,Km(SAM)=0.9μM;ITC测定其辅因子结合热力学ΔH=-8.6kcal/mol,结构模型与PDB1O9S重叠RMSD<0.5Å。His标签兼容SPR、AlphaLISA及Pull-down,可高通量筛选SAM竞争性抑制剂或底物模拟肽,加速糖尿病、病表观治先导化合物的发现。该重组蛋白为解析SETD7底物谱、开发位点特异性甲基化调控策略提供了高活性、可规模化的研究级试剂。

TaqDNAPolymerase:科研中的关键工具TaqDNAPolymerase是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点TaqDNAPolymerase的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermusaquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5→3聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3→5校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5→3外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一种用于实时荧光定量PCR的试剂盒,它结合了反转录和PCR扩增步骤。

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Uracil-DNAGlycosylase(Heat-labile,Bacterium)是一种来源于嗜冷海洋细菌的热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。该酶能够特异性地催化水解含有尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶碱基,释放游离尿嘧啶,并在DNA中产生无碱基位点(AP位点),从而防止PCR产物的气溶胶污染。产品特点与传统UDG酶相比,热敏UDG酶在室温下即可高效发挥作用,且对温度极为敏感,可在50℃下10分钟内完全失活。这种特性使其在PCR和RT-PCR反应中表现出色,尤其适用于需要快速灭活的场景。此外,该酶对单链和双链DNA均具有活性,但对RNA或不含尿嘧啶的DNA无作用。其高纯度和低残留特性使其在高投入量下也不会对检测体系产生抑制。应用场景去除PCR产物污染:通过降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染导致的假阳性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反应中,热敏UDG酶可在逆转录前去除残留的PCR产物。单链或双链DNA处理:用于去除DNA中的尿嘧啶碱基。在使用过程中,建议将酶液存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后立即放回-20℃保存。此外,热敏UDG酶在RT-qPCR反应中表现出良好的兼容性,即使在高投入量下也不会对反应产生抑制。在CRISPR-Cas9等基因编辑技术中,使用Pfu DNA Polymerase进行修复模板的合成。Mouse Fractalkine/CX3CL1

Multiplex Probe qPCR Mix 是一种浓缩预混液,含有抗体技术修饰的热启动酶Hotstart Taq DNA聚合酶。Mouse Fractalkine/CX3CL1

重组人KLKB1蛋白(RecombinantHumanKLKB1Protein,HisTag)是一种重要的丝氨酸蛋白酶,又称血浆激肽释放酶(PlasmaKallikrein),在凝血、炎症反应、血压调节及补体启动等多种生理过程中发挥关键作用。KLKB1主要由肝脏合成,以无活性的酶原形式存在于血浆中,经因子XIIa切割后启动,参与激肽释放酶-激肽系统(Kallikrein-KininSystem)的级联反应。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其N端融合了His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化,获得高纯度、高稳定性的蛋白产物。这种设计不仅提高了蛋白的溶解性和稳定性,也方便了后续的实验操作,如酶活性分析、抑制剂筛选及蛋白相互作用研究等。KLKB1在多种疾病中具有重要作用,包括遗传性血管性水肿、血栓形成、炎症性疾病及糖尿病并发症等。因此,重组人KLKB1蛋白不仅是研究凝血和炎症机制的重要工具,也为开发相关疾病的治药物提供了有力支持,具有重要的科研和临床应用价值。Mouse Fractalkine/CX3CL1

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10×DNA Loading Buffer:助力DNA电泳的关键试剂在分子生物学研究中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段的大小和纯度。而10×DNA Loading Buffer作为电泳实验中的关键试剂,其性能和特点对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。一、产品特点10×DNA Loading Buffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。其主要成分包括甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青等。甘油的高密度特性使得DNA样品能够快速沉入凝胶加样孔中,避免样品漂浮。EDTA则可螯合反应缓冲液中的Mg²⁺,终止反应,防止核酸外切酶活性导致的产物降解。此...

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