T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。Pfu DNA Polymerase具有3'→5'外切酶活性,能够实时校正DNA合成过程中错误掺入的碱基,降低PCR扩增的错误率。Recombinant Human IL-23 P19/IL-23AProtein,hFc Tag

ProbeqPCRMix(2×,UDGPlus):高效防污染的探针法qPCR解决方案ProbeqPCRMix(2×,UDGPlus)是一种为探针法实时荧光定量PCR(qPCR)设计的即用型预混液,结合了热启动TaqDNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dUTP和UDG酶,能够有效防止PCR产物污染,提高检测的特异性和准确性。产品特点高特异性和灵敏度:采用抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶,结合优化的反应缓冲液,有效减少非特异性扩增,提高检测灵敏度。防污染设计:预混液中包含UDG酶和dUTP,可在反应前降解含尿嘧啶的PCR产物,防止气溶胶污染。多重检测能力:支持多重qPCR反应,可在同一反应中同时检测多个目标基因。操作简便:2×预混液设计,只需加入引物、探针和模板即可进行反应,减少了操作步骤和污染风险。应用场景基因表达分析:用于定量检测特定基因的表达水平。病原体检测:快速检测病毒、细菌等病原体的DNA。多重检测:可在同一反应中同时检测多个目标基因。ProbeqPCRMix(2×,UDGPlus)是一种高效、特异且防污染的qPCR试剂,适用于多种应用场景,能够显著提高实验的准确性和重复性。其UDG系统和优化的反应体系使其成为分子生物学研究和临床检测中的重要工具。Recombinant Mouse PD-L2/B7-DC Protein,His TagAluI 的识别序列是“AG^CT”,这一序列在基因组中相对常见。

重组人Latexin蛋白(RecombinantHumanLatexinProtein,HisTag)是一种天然存在于哺乳动物组织中的羧肽酶抑制剂,主要在神经系统、免疫系统和某些外周组织中表达。Latexin是目前已知的只有一种能够特异性抑制羧肽酶A(CPA)和羧肽酶B(CPB)活性的内源性蛋白,在调控蛋白质降解、细胞分化及炎症反应等过程中发挥重要作用。该重组蛋白通常采用大肠杆菌或真核表达系统(如HEK293细胞)制备,N端带有His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化,获得高纯度、高稳定性的蛋白产物。His标签的引入不仅提高了蛋白的溶解性,也便于后续的Westernblot、ELISA、酶活性抑制实验及蛋白相互作用研究。研究表明,Latexin在神经系统发育、干细胞维持及病抑制中具有潜在功能。例如,在神经干细胞中,Latexin可能通过调控蛋白酶活性影响细胞命运决定;在某些病中,其表达水平与病进展呈负相关,提示其可能具有抑病作用。因此,重组人Latexin蛋白不仅是研究蛋白酶调控机制的重要工具,也为开发相关疾病的治策略提供了有力支持,具有广的科研和临床应用前景。
10×DNALoadingBuffer是一种高浓度的即用型试剂,广泛应用于DNA凝胶电泳实验中。它通过添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使DNA样品在电泳过程中更容易沉降并被观察,是DNA分析实验中不可或缺的工具。产品特点高密度与染料标记:10×DNALoadingBuffer含有高浓度的甘油或蔗糖,能够使DNA样品在电泳时沉降于凝胶孔底部,避免漂浮。同时,其中的染料(如溴酚蓝或二甲苯蓝)可以指示DNA迁移的位置,便于实时观察电泳进程。即用型设计:无需额外配制,直接与DNA样品混合即可使用,简化了实验操作。兼容性强:适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA、基因组DNA片段等,也兼容琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳。稳定保存:常温保存,稳定性高,无需特殊处理。应用场景DNA片段分离:在琼脂糖凝胶电泳中,用于分离和分析DNA片段,如PCR产物、质粒DNA、限制性酶切片段等。电泳指示:染料的迁移速率可以作为DNA片段大小的参考,帮助判断目标片段的位置。DNA回收:在DNA回收实验中,帮助定位目标条带,便于后续的切胶回收操作。FnCas12a不仅可用于体外dsDNA的特异剪切,也可用于靶标核酸的快速检测,如HOLMES核酸快检技术。

重组人LAMP5蛋白(RecombinantHumanLAMP5Protein,hFcTag)是一种重要的溶酶体相关膜蛋白,属于LAMP家族成员,主要表达于免疫细胞,尤其是树突状细胞和巨噬细胞中。LAMP5(Lysosome-AssociatedMembraneProtein5)在抗原呈递、免疫调节及细胞自噬等过程中发挥关键作用,是近年来免疫学及细胞生物学研究的热点分子之一。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其C端融合了人IgGFc(hFc)标签,不仅提高了蛋白的稳定性和溶解性,还便于通过ProteinA亲和层析进行高效纯化。此外,hFc标签还可用于免疫共沉淀、流式细胞术及体内功能研究等实验。研究表明,LAMP5在调节免疫应答、参与溶酶体功能及维持细胞内环境稳定中具有重要作用。其表达异常与多种免疫相关疾病及病的发长发展密切相关。因此,重组人LAMP5蛋白不仅是研究溶酶体功能及免疫调节机制的重要工具,也为开发相关疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和临床应用价值。该预混液适用于多种抗凝剂处理的血液样本,但优先推荐使用EDTA抗凝血,因为EDTA可以更好地抑制核酸降解。Recombinant Mouse PD-L2/B7-DC Protein,His Tag
AvaII 的识别序列是“G^GWCC”,其中“W”表示腺嘌呤(A)或胸腺嘧啶(T)。Recombinant Human IL-23 P19/IL-23AProtein,hFc Tag
PhusionDNAPolymerase是一种高性能的热稳定DNA聚合酶,以其保真度、快速扩增能力和强大的反应稳定性而闻名,被广应用于分子生物学的各个领域。PhusionDNAPolymerase的重要优点在于其高保真性。其错误率比TaqDNA聚合酶低50倍以上,比PfuDNA聚合酶低6倍。这种高保真性使其成为克隆、测序模板制备、突变分析以及长片段或高GC含量模板扩增等应用的理想选择。此外,Phusion酶的独特结构融合了类似Pyrococcus来源的酶和增强持续合成能力的结构域,使其在扩增速度和稳定性方面表现出色。PhusionDNAPolymerase的另一个特点是其快速扩增能力。其延伸速度可达15-30秒/kb,比传统Pfu酶快10倍。这种高速扩增能力不仅提高了实验效率,还减少了因长时间反应导致的非特异性扩增。PhusionDNAPolymerase还具有强大的反应稳定性和多功能性。它能够高效扩增长达20kb的DNA片段,并且对复杂的高GC含量模板表现出色。此外,Phusion酶还提供热启动版本,进一步减少了非特异性扩增,适合高通量PCR和自动化应用。PhusionDNAPolymerase的应用范围广,包括常规PCR、长片段扩增、高通量PCR、克隆和测序模板制备等。其配套的优化缓冲液和GC增强剂使其能够适应各种复杂的模板和反应条件。Recombinant Human IL-23 P19/IL-23AProtein,hFc Tag
重组人ITCH蛋白是一种重要的E3泛素连接酶,属于HECT(HomologoustoE6APC-Terminus)家族,在蛋白质降解、信号转导和免疫调节等多种细胞过程中发挥关键作用。ITCH蛋白通过催化底物蛋白的泛素化,调控其降解或功能改变,从而参与细胞周期、炎症反应和应激响应等生物学过程。该重组蛋白通常采用真核表达系统(如昆虫细胞或哺乳动物细胞)制备,以确保其正确的折叠和酶活性。ITCH蛋白具有典型的HECT结构域,能够特异性识别并结合底物蛋白,通过泛素-蛋白酶体途径介导其降解。其重组表达形式为研究人员提供了高纯度、高活性的蛋白工具,便于进行体外泛素化实验、蛋白相互作用研究及药物筛选等应用。...