加入漂洗缓冲液(体积是树脂柱床体积的7.5倍)并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min;≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液(体积是树脂柱床体积的5倍)与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min;≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体,在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时,可以延长结合反应时间,并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。黄浦区超滤浓缩管联系电话
创新的纯化 - 浓缩 - 换液一体化系统
Amicon® Pro 纯化超滤系统
目前的蛋白纯化常常包括很多步骤,用到多种器具,却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险,减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间,默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作,使纯化浓缩蛋白变得简便高效,数据稳定易得。
开放的设计使您可以根据实际需要灵活使用,Amicon®Pro将成为实验室小量蛋白纯化、浓缩、换液各种操作的多功能工具。 嘉定区Millipore超滤浓缩管上海超滤浓缩管代理销售哪家好?
大体积样品浓缩
Centricon® Plus-70离心浓缩装置
用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL;死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同,样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计,加快处理速度;反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法,是非常方便的工具。
特别推荐的应用:
色谱洗脱产物的浓缩和脱盐
单克隆抗体浓缩
培养上清中蛋白和***的浓缩
组织匀浆液和细胞裂解液澄清
浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过
程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。
污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。 超滤浓缩管的主要优势是什么。
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用:
大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤(Diafiltration)模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,
使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点
集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。 超滤浓缩管的优势您了解多少呢?嘉定区Millipore超滤浓缩管
上海 超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。黄浦区超滤浓缩管联系电话
操作模式
常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流
过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常
用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF)
液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表
面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离
的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF
技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩
和分离操作也变得更加方便。 黄浦区超滤浓缩管联系电话
上海益启生物科技有限公司致力于化工,是一家贸易型公司。益启生物致力于为客户提供良好的试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,一切以用户需求为中心,深受广大客户的欢迎。公司将不断增强企业重点竞争力,努力学习行业知识,遵守行业规范,植根于化工行业的发展。益启生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。