7次低速离心，总耗时~100分钟（含60分钟孵育时间）
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（可选用50k MWCO型号）。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 超滤浓缩管的各种系列应用领域还是不一样的。杨浦区默克超滤浓缩管联系人
通量（超滤效率）及其影响因素
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的
通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时
会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参
与影响通量的因素很多，包括：
压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力
（TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯，
这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚
至可能随着压力的增加而降低。 崇明区默克超滤浓缩管参数超滤浓缩管的优势您了解多少呢？
Centrifree®过滤器
Centrifree® 过滤器拥有研究及体外诊断证书（美国适用），是为临床研究实验室的样品制备而设计的，能够快速、高效地通过超滤去除小体积（0.15–1.0 mL）血清、血浆等生物样品中的蛋白未结合的小分子溶质。数分钟之内完成精确的分离，样品终体积约为 10μL；不会发生样品稀释、pH 值变化、离子成分变化或未结合小分子溶质浓缩等情况。这种产品使用的是低吸附的再生纤维素膜，亲水膜和 O 型圈，不含增塑剂，确保获得较好的样品回收效果。
优点与应用：
分离血清、血浆等生物学样品中未
吸附的小分子物质
精确的药物结合实验样品制备**
去除生物样品中的蛋白质等大分子
的干扰，减少样品复杂性
测 定 游 离 型 *** 药 物、睾 丸 ***、
甲 状 腺 素 等，用 于 生 物 活 性 研 究、
药物结合分析等新药评估过程
对于慢***推荐Amicon® Ultra 100kDa; 对于腺***推荐Amicon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤可以参考***浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV（腺相关***）的制备方法供参考。
去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度（Critical Micelle Concentration, CMC）时，去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果。
Amicon® Ultra超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。如果干扰仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。 益启生物公司专业 从事超滤浓缩管代理销售。
大体积样品浓缩
Centricon® Plus-70离心浓缩装置
用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同，样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计，加快处理速度；反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法，是非常方便的工具。
特别推荐的应用：
色谱洗脱产物的浓缩和脱盐
单克隆抗体浓缩
培养上清中蛋白和***的浓缩
组织匀浆液和细胞裂解液澄清 上海超滤浓缩管哪家比较好？无锡超滤浓缩管哪家优惠
上海超滤浓缩管销售公司电话多少？杨浦区默克超滤浓缩管联系人
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。
有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。
研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。
样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。 杨浦区默克超滤浓缩管联系人
上海益启生物科技有限公司致力于化工，以科技创新实现***管理的追求。公司自创立以来，投身于试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，是化工的主力军。益启生物继续坚定不移地走高质量发展道路，既要实现基本面稳定增长，又要聚焦关键领域，实现转型再突破。益启生物始终关注化工市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。
