近年来随着分离纯化技术的提高，关于外泌小体的研究成果颇丰；这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索，已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求，以及起始样品的规模、数量，可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒，对操作人员也没有特别的经验要求，超滤法后来居上，成为实验室中制备外泌体的通用方法。您了解 超滤浓缩管的优势吗？静安区Merck超滤浓缩管一级代理
抗体标记
适合25-200μg样品操作
5次低速离心，总耗时~50分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 加入抗体样品
• 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL）
- 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。
- 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。
• 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL）
- 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。
- 将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。
3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。
4. 4,000×g离心15 min。
5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。
6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。
7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。
8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 上海Merck离心浓缩管代理商超滤浓缩管应用领域你知道吗。
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。
7. 4,000×g离心15 min。
8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
用Protein A或G对抗体进行亲和纯化
Amicon® Ultra 4 mL 超滤管
-离心速度快而保持很高的回收率
4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon®
Ultra 4mL 超滤管中浓缩（3kDa 细胞色素 C，
10kDa 细胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG），
测定在离心一定时间后的回收率。数据显
示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均
>95%。
为了方便初次使用者选择**合适的超
滤管产品，默克密理博生命科学部网
站上提供选择指引，您只需要按照提
示进行选择，**终会选出一款产品。
为每次实验选择**合适的，
您也能快速成为超滤高手！ 益启生物公司的 超滤浓缩管种类繁多。
特别推荐应用（提供实验报告作为参考）
Microcon®超滤管：
Microcon®PCR 级超滤管：
• 法医鉴定分析的DNA样品制备
• 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换
• 体外合成mRNA的纯化
• 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针
• 游离标记物的去除
• 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究
• 替代乙醇沉淀，离心法高效浓缩基因组DNA
应用指南
典型应用
肽及生长因子浓缩
蛋白浓缩与脱盐
电泳等操作前的蛋白样品浓缩
HPLC前去除蛋白
组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化
生物样本浓缩（抗原，抗体，酶等）
从含有SDS（或无SDS）的缓冲液中浓缩gDNA
核酸浓缩与脱盐（单链或双链核酸）
去除标记核苷酸
去除标记氨基酸
从扩增的DNA产物中去除引物
克隆前去除连接序列（linker） 益启生物公司主营 超滤浓缩管销售。青浦区离心浓缩管商家
对于不同的需求我们选择不同的 超滤浓缩管系列。静安区Merck超滤浓缩管一级代理
操作模式
常规与切向流 : 常规溶液过滤（NFF）中液体在压力或真空驱动下直接流
过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上，小分子则通过膜流出。NFF 常
用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤（TFF）
液体流过时与膜表面呈一定角度，被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表
面，而且还会被切向流从膜表面扫除，因此 TFF 成为按分子大小不同分离
的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法，而现在，TFF
技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中，使小体积样品的浓缩
和分离操作也变得更加方便。 静安区Merck超滤浓缩管一级代理
上海益启生物科技有限公司主要经营范围是化工，拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。公司业务分为试剂，耗材，科研试剂，仪器设备等，目前不断进行创新和服务改进，为客户提供良好的产品和服务。公司秉持诚信为本的经营理念，在化工深耕多年，以技术为先导，以自主产品为重点，发挥人才优势，打造化工良好品牌。益启生物立足于全国市场，依托强大的研发实力，融合前沿的技术理念，飞快响应客户的变化需求。
