加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 超滤浓缩管的优势您了解多少呢？江苏Millipore超滤浓缩管代理价
通量（超滤效率）及其影响因素
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的
通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时
会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参
与影响通量的因素很多，包括：
压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力
（TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯，
这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚
至可能随着压力的增加而降低。 南京默克超滤浓缩管哪家好超滤浓缩管的优点有很多。
Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失基本上大概小。
如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？
按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。
Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。
Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。
不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。
浓度：当需要截留的样品浓度很低时，通量通常不受浓度影响。操作过
程中，随着溶质浓度的升高，增加的粘滞性和极化将导致通量降低。
温度：粗体，作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可
以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%，同时溶液粘度降低。
实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。
pH：改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI
值蛋白会沉淀，产生堵塞和得率损失。
污垢：溶液中除了目的分子造成的浓差极化，还有其它小颗粒和分子会
在膜上富集和沉淀，逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中，形成结晶和沉淀。 上海超滤浓缩管供应商。
首先，Amicon® Ultra超滤管的蛋白比较低起始浓度为25ug/ml。请确保样本的起始浓度大于这个浓度。其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因：
1）如果目的样本在滤过液中，那么请排查：
a）是否选择了合适截留分子量的超滤管（目的蛋白分子量的1/2或者1/3）？
b）使用的离心力是否是在限定范围内？如果使用的是rpm，请换算成相应的g离心力，具体换算方法请垂询。
c）离心机**近是否有校准过？
d）是否***尝试这个蛋白？ 超滤浓缩管哪家比较靠谱？宝山区离心浓缩管批发
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蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过
20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，建议的改进方法是：
1）离心力降为推荐离心力的30%-50%
2）改用截留分子量更大的超滤管（如原本选用10k，此时可以选择30k） 3）在浓缩过程中取出超滤管，用***头反复吹吸几次后再继续浓缩
Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。如果出现这种情况，请先用0.1 N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。 江苏Millipore超滤浓缩管代理价
上海益启生物科技有限公司位于漕宝路400号明申商务广场907、908。益启生物致力于为客户提供良好的试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，一切以用户需求为中心，深受广大客户的欢迎。公司注重以质量为中心，以服务为理念，秉持诚信为本的理念，打造化工良好品牌。益启生物凭借创新的产品、专业的服务、众多的成功案例积累起来的声誉和口碑，让企业发展再上新高。
