截留
截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近
的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强
度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然”
分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下
会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择
合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择
为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。 超滤浓缩管代理销售哪家比较靠谱。南京Merck离心浓缩管代理商
通量(超滤效率)及其影响因素
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的
通量的定义是流量除以面积,使用高 NMWL 滤膜可以增加通量,但同时
会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参
与影响通量的因素很多,包括:
压力:较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时,流量随着跨膜压力
(TMP)的增大而增加。正压条件下操作,如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯,
这种因素影响较为明显。如果极化影响***,通量会达到一个平台,甚
至可能随着压力的增加而降低。 南京超滤浓缩管商家超滤浓缩管应用领域你知道吗。
提供的超滤管是没有经过去内***处理的,同时由于内***通常以多聚体的形式存在,大小
在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q®水/缓冲液清洗的步骤去除大部分内***。关于针对Amicon®,Microcon® , Centricon®尝试过的内***去除方案。
Amicon® Ultra超滤管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附比较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理。也可以尝试换成Amicon® Ultra 0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。
特点与优点
温和的磁力搅拌避免发生聚集和剪切变性
所有型号都可以高压灭菌
提供 3 种规格共选择,用于浓缩 3mL - 400mL 及更大体积样品
浓度达 10% 的溶液依然可以获得高流速
应用:
大分子(如蛋白、酶、抗体和***)溶液的浓缩和缓冲液置换
渗滤(Diafiltration)模式
非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被
去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,
使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点
集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在**恒定、温和的条件下高效换液。 超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢?
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 超滤浓缩管直销公司。长宁区默克2ml超滤浓缩管批发
超滤浓缩管的优缺点您知道吗?南京Merck离心浓缩管代理商
Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品回收,避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误;
其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小;
合理的死体积设计,避免样品离干而降低回收率;
能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。
有效浓缩同时保证高的蛋白回收率
设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。
南京Merck离心浓缩管代理商
上海益启生物科技有限公司主要经营范围是化工,拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。公司自成立以来,以质量为发展,让匠心弥散在每个细节,公司旗下试剂,耗材,科研试剂,仪器设备深受客户的喜爱。公司将不断增强企业重点竞争力,努力学习行业知识,遵守行业规范,植根于化工行业的发展。益启生物立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,飞快响应客户的变化需求。