离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。
化学相容性与溶出
样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量 一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您知道吗?宝山区默克0.5ml超滤浓缩管联系电话
用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截
留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜,
75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。 松江区默克15ml超滤浓缩管哪家优惠超滤浓缩管的优点有很多。
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。
温和的高浓度样品浓缩、脱盐装置
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤杯
Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(达 **分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是比较好选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。 您了解 超滤浓缩管的优势吗?
Minicon®浓缩器
Minicon® 浓缩器用于在电泳或免疫电泳分析前对尿液和脑脊液进行浓缩,以增强对不正常或病态的蛋白质(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的识别。B15型有 8 个浓缩单元,用于 5mL 样本的处理;CS15型有 10 个浓缩单元,适合 2.5mL 样品的处理。溶剂和盐分通过超滤被吸收剂吸收而样品被浓缩。
优点与应用
静态浓缩器,不需要其它辅助装置
浓缩倍数达到 100 倍,样品终体积小
同时浓缩多个临床样品
特别推荐用于尿液、脑脊液等的蛋白
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Amicon® Ultra 4 mL 超滤管
-离心速度快而保持很高的回收率
4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon®
Ultra 4mL 超滤管中浓缩(3kDa 细胞色素 C,
10kDa 细胞色素 C,30kDa BSA,100kDa IgG),
测定在离心一定时间后的回收率。数据显
示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均
>95%。
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滤管产品,默克密理博生命科学部网
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