脱盐/缓冲液置换并浓缩
5次低速离心，总耗时~35分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。
3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。
4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。
5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。
6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。
* 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书
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用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截
留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜，
75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。 上海超滤浓缩管超滤浓缩管的好处您了解多少呢？
核苷酸截留分子量（NCO）
超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸
和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏
过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择
滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。
浓差极化
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分
子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作
用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分
也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
高通量超滤
MultiScreen®超滤膜板
MultiScreen® 超滤膜板是实现高通量生物样品处理的必备工具，能配合自动化工作平台对样品进行纯化、浓缩、脱盐或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 种带有低吸附超滤膜的 96 孔板，在高通量操作时样品吸附损失小而得率高。
优点与应用：
高通量：96 孔超滤膜板和 384 孔膜板
可靠：低蛋白吸附，蛋白得率高，孔间数据均一性好
功能多样：样品体积 50-500μL 适用，兼容各种 96/384 孔板标准操作设备或自动化平台
用于高通量蛋白鉴定与筛选的浓缩、脱盐，以及样品分析前大分子蛋白去除
也可用于核酸（DNA/RNA/PCR 产物 / ***）样品制备及二代测序样品制备 超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢？
通量（超滤效率）及其影响因素
超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的
通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时
会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参
与影响通量的因素很多，包括：
压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力
（TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯，
这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚
至可能随着压力的增加而降低。 超滤浓缩管的优缺点您知道吗？静安区浓缩管商家
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这是一种只用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。
为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，只需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。
Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准
操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改
善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。 宝山区Millipore超滤浓缩管哪家优惠
上海益启生物科技有限公司位于漕宝路400号明申商务广场907、908，拥有一支专业的技术团队。专业的团队大多数员工都有多年工作经验，熟悉行业专业知识技能，致力于发展默克密理博,默克, 密理博, 西格玛 ,安倍, 罗氏, 普兰德 的品牌。公司不仅*提供专业的 从事生物科技（除生物试剂）领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；室内外装潢；建筑工程设计与施工；展览展示服务；计算机及配件、化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品）实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。，同时还建立了完善的售后服务体系，为客户提供良好的产品和服务。上海益启生物科技有限公司主营业务涵盖试剂，耗材，科研试剂，仪器设备，坚持“质量保证、良好服务、顾客满意”的质量方针，赢得广大客户的支持和信赖。
