抗体标记 适合25-200μg样品操作 5次低速离心，总耗时~50分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 加入抗体样品 • 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL） - 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。 • 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 大体积样品浓缩 Centricon® Plus-70离心浓缩装置 用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。 你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗？浦东新区默克超滤浓缩管
通量（超滤效率）及其影响因素 超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的 通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时 会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参 与影响通量的因素很多，包括： 压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力 （TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯， 这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚 至可能随着压力的增加而降低。奉贤区默克4ml超滤浓缩管联系电话超滤浓缩管哪家比较靠谱？
虽然影响因素较多，我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。截留微滤中膜的孔径大小通常以微米计，表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据NMWL分级，有时也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见，实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时 膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时，孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时，需要谨慎地选择合适的 NMWL膜和设备。虽然影响因素较多，我们通常建议截 留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。 7. 4,000×g离心15 min。 8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 用Protein A或G对抗体进行亲和纯化上海超滤浓缩管代理销售哪家好？
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。 有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。 研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。 样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。上海超滤浓缩管哪家比较好？江苏默克超滤浓缩管商家
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创新的纯化 - 浓缩 - 换液一体化系统 Amicon® Pro 纯化超滤系统 目前的蛋白纯化常常包括很多步骤，用到多种器具，却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险，减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间，默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作，使纯化浓缩蛋白变得简便高效，数据稳定易得。 开放的设计使您可以根据实际需要灵活使用，Amicon®Pro将成为实验室小量蛋白纯化、浓缩、换液各种操作的多功能工具。浦东新区默克超滤浓缩管
