如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。 2)如果目的样本也不在滤过液中,那么: a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。买超滤浓缩管找益启生物公司。杨浦区默克超滤浓缩管一级代理
样品的澄清、过滤和除菌 Ultrafree®-MC和Ultrafree®-CL微滤管 Ultrafree®-MC(0.5mL)和Ultrafree®-CL(2mL)是一次性使用的微滤离心管,可以用于各种水性样品和在某些溶剂中的样品除颗粒物、除沉淀的处理。提供两种体积及多种膜孔径以及已经经过无菌处理的产品供选择。Ultrafree®微滤离心管操作简便、样品回收率高且重复性很好,是蛋白和核酸样品处理的理想选择。 特点与优点 有0.1-5.0μm五种膜孔径供选择 采用高回收率的亲水Durapore® (PVDF)膜和亲水PTFE膜 提供无菌包装和非无菌包装形式产品 过滤速度快,数据稳定、重现性好 上样体积为0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL离心管固定转子(MC)或15mL离心管转子使用 顶盖颜色标识易于区分膜孔径南京默克超滤浓缩管哪家好上海超滤浓缩管代理销售推荐益启生物公司。
加入漂洗缓冲液(体积是树脂柱床体积的7.5倍)并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min;≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液(体积是树脂柱床体积的5倍)与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min;≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体,在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时,可以延长结合反应时间,并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。
高通量超滤 MultiScreen®超滤膜板 MultiScreen® 超滤膜板是实现高通量生物样品处理的必备工具,能配合自动化工作平台对样品进行纯化、浓缩、脱盐或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 种带有低吸附超滤膜的 96 孔板,在高通量操作时样品吸附损失小而得率高。 优点与应用: 高通量:96 孔超滤膜板和 384 孔膜板 可靠:低蛋白吸附,蛋白得率高,孔间数据均一性好 功能多样:样品体积 50-500μL 适用,兼容各种 96/384 孔板标准操作设备或自动化平台 用于高通量蛋白鉴定与筛选的浓缩、脱盐,以及样品分析前大分子蛋白去除 也可用于核酸(DNA/RNA/PCR 产物 / ***)样品制备及二代测序样品制备益启生物公司的超滤浓缩管系列有很多。
蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩) * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 3次低速离心,总耗时~75分钟(含60分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂(沉降的柱床体积)和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。(柱床)树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。 2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*,其间可温和搅动促进结合。超滤浓缩管服务电话是多少呢。江苏Merck超滤浓缩管规格
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离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量杨浦区默克超滤浓缩管一级代理