外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？超滤浓缩管和其他的空压机有什么区别呢？常州默克0.5ml超滤浓缩管
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。静安区Millipore超滤浓缩管商家益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。
特点与优点： 特别的反转离心回收设计，滞留体积很小，样品损失少， 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干，保证样品回收率和活性 有四种截留分子量供选择 法医gDNA鉴定、PCR产物纯化与小分子分离 Microcon® 超滤管 Microcon®为横膜式超滤管，没有死体积，用于大分子样品的浓缩、脱 盐、换液都非常高效方便。实际应用中还常用于大分子与其它分子的分 离，比如蛋白酶切后的处理及药物结合率分析等等。
Amicon® Ultra 4 mL 超滤管 -离心速度快而保持很高的回收率 4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon® Ultra 4mL 超滤管中浓缩（3kDa 细胞色素 C， 10kDa 细胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 测定在离心一定时间后的回收率。数据显 示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均 >95%。 为了方便初次使用者选择**合适的超 滤管产品，默克密理博生命科学部网 站上提供选择指引，您需要按照提 示进行选择，**终会选出一款产品。 为每次实验选择**合适的， 您也能快速成为超滤高手！Millipore超滤浓缩管用于蛋白超滤、浓缩、除盐！
大体积样品浓缩 Centricon® Plus-70离心浓缩装置 用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。依起始材料不同、起始体积不同，样品可被浓缩50-200倍。低吸附竖向再生纤维素超滤膜及双超滤柱设计，加快处理速度；反转离心操作进一步使宝贵的浓缩样品回收率得以提高。这个产品替代传统的透析、冻干、沉淀或搅拌式浓缩等技术和方法，是非常方便的工具。 特别推荐的应用： 色谱洗脱产物的浓缩和脱盐 单克隆抗体浓缩 培养上清中蛋白和***的浓缩 组织匀浆液和细胞裂解液澄清超滤浓缩管的系列有很多。宝山区默克4ml超滤浓缩管一级代理
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Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失基本上大概小。 如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少？ 按照经验，建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级（10倍）。 Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。 Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。 不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶；残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。常州默克0.5ml超滤浓缩管
