定位准确、形态与功能相结合
该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。
7、从蛋白水平检测角度，免疫组化技术与Western blotting、ELISA的异同
1）Western blotting
蛋白质免疫印迹，也是利用抗体抗原反应原理，结合化学发光等技术来检查组织或细胞样品内蛋白含量的检测方法。与免疫组化技术相比，定量可能更加准确；当然Western blotting也可定性和定位（通过提取膜蛋白或核酸白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量，进而间接反映它们的定位），但敏感性远远低于免疫组化技术。
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石蜡切片厚4～6μm，捞片于多聚赖氨酸防脱水剂中，60℃烘烤30min～60min，再脱蜡、脱水。这个处理过程的关键是要保证梯度二甲苯和酒精的浓度，使组织脱蜡、脱水干净彻底，否则，水洗后切片含有“油珠”，呈云雾状，冲洗不干净，致使抗体在组织上分布不均，导致染色效果不佳。我科的方法是:普通常规染色所用的梯度二甲苯和酒精与免疫组织化学染色所用的梯度二甲苯和酒精分开，并且定期更换液体。在二甲苯脱蜡时，二甲苯I和II脱蜡时间不少于半小时，梯度酒精各5min左右。如在室温较低时，应将梯度二甲苯放于恒温箱中提前预热，梯度酒精时间延长，保证组织的充分脱蜡脱水。内蒙古免疫学免疫组化实验公司免疫组化，HE染色，免疫荧光找上海融享生物。
封片
为了长期保存，我们一般用中性树胶等封片，避免产生气泡，方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液，然后一手拿住盖片某一拐角，而另一手拿对面的那个拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接触到液体时为止；当发现液体接触面在不断弥散时，则可以缓慢降低另一拐角，这样一般不会产生气泡。免疫荧光方法中的重要环节
1）冰冻切片制备
建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。
（1）ABC复合物的制备：（2）ABC法反应原理6．SP或SAP法（过氧化物酶标记的链霉卵白素或过氧化物酶标记的碱性磷酸酶染色）Streptavidin/peroxidaseorstrepta-vidin/alkalinephosphatase）※该法是ABC法基础上的进一步改良，使卵白素与链霉（而非生物素）结合，而后再结合PO。它有4个亚基可与生物素结合，灵敏特异，背景低，成本低。现在还有plus盒。优点是：更简便，放大倍数↑，等电点中性更适合组织。分子量小，穿透力↑。7．蛋白A—金法（Protein—Agoldmethod）~多用于电镜8．双重组化染色法应用双重免疫组织化学可在同一张切片，同一细胞或亚细胞结构内同时显示两种不同的抗原。9．免疫金—银染色法（Immunogold—silverstainingIGSS）固定——见前述注意事项：1．固定剂的选择：因组织而不同，注意质量和性能。2．固定方式的选择：①浸渍固定（参考文献）②灌注固定（+后固定）③蒸汽固定免疫组化染色步骤（以ABC法为例）1．切片脱蜡入水，入PBS洗三次/15分钟。2．封闭内源性过氧化物酶。用新配置的（在PAS或—HCL缓冲液）室温，30分钟。3．水洗，入PBS，洗三次，每次5分钟。4．减少非特异性着色用稀释20倍的正常血清（产生二次抗体动物血清！），室温，30分钟。免疫组化检测服务找融享生物。
临床资料 31例乳腺患者均为女性，年龄26～62岁，中位年龄49岁。病程5天～18个月。其中浸润性导管23例，浸润性小叶*6例，粘液2例。肿块比较大径1.4～6.5cm。
2.2 组织芯片质量 自行设计和制做的组织芯片能够满足观察研究的要求，但由于为手工所制，组织芯排列不够整齐，且0.5mm直径组织芯在HE染色和免疫组化染色过程中易发生位置滑动，并有少量脱片。
2.3 组织学检查 乳腺浸润性导管细胞异型性较显现，胞质丰富，红染、淡红染或透明，核大，核仁明显，核分裂像易见，成不规则条索、巢状、片状排列，可见腺样结构。浸润性小叶**细胞较小，相互间粘附性差，稍松散，常呈单排列样浸润于胶原纤维束间，围绕正常导管呈同心圆状排列，部分病例见小巢状、腺泡状结构。粘液腺*见小簇细胞成腺状、小巢状散在漂浮于粘液湖中。
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目的 比较抗原修复对多聚甲醛固定脑组织冰冻切片免疫组化结果的影响。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛经心腔灌注、固定后，分别经15%及30%蔗糖梯度脱水后进行冰冻切片（10μm），取相同部位切片20张，用兔抗Ach-M 2 受体多克隆抗体和小鼠抗DA-D 2 受体多克隆抗体作S-P免疫组化染色。 结果 经抗原修复的冰冻切片组的阳性结果比未经抗原修复组有明显提高。 结论 本实验次发现多聚甲醛固定的组织冰冻切片经抗原修复可以提高免疫反应敏感性或提升抗体效价。机制可能与多聚甲醛固定后对抗原有封闭作用有关。吉林动物实验免疫组化公司哪里有
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