目的 比较抗原修复对多聚甲醛固定脑组织冰冻切片免疫组化结果的影响。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛经心腔灌注、固定后，分别经15%及30%蔗糖梯度脱水后进行冰冻切片（10μm），取相同部位切片20张，用兔抗Ach-M 2 受体多克隆抗体和小鼠抗DA-D 2 受体多克隆抗体作S-P免疫组化染色。 结果 经抗原修复的冰冻切片组的阳性结果比未经抗原修复组有明显提高。 结论 本实验次发现多聚甲醛固定的组织冰冻切片经抗原修复可以提高免疫反应敏感性或提升抗体效价。机制可能与多聚甲醛固定后对抗原有封闭作用有关。上海融享生物做各类病理实验 免疫荧光,HE染色服务实验等服务。山西IHC免疫组化公司哪家好
意义编辑
近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中，5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：
⑴恶性的诊断与鉴别诊断；
⑵确定转移性恶性的原发部位；
⑶对某类进行进一步的病理分型；
⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的；
⑸发现微小转移灶，有助于临床方案的确定，包括手术范围的确定。
⑹为临床提供方案的选择。
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它的原理
根据抗原抗体反应和化学显色原理情况，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，较终通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。
阴性染色产生的原因有:
⑴一抗和二抗浓度不合适或孵育条件不妥。
⑵荧光素提前衰退。荧光素质量不佳或操作过程中没有注意避光等防止荧光素衰退的事项。
⑶血清封闭时间过长。
⑷抗体稀释液PH值不合适，影响抗原抗体反应。
⑸组织切片不平、裂片或脱片很严重，易引起大块阴性着色。
⑹组织标本不新鲜或已经冷冻组织制成的切片中抗原易弥散，易引起本来表达的部位阴性染色或弱着色。
⑺荧光显微镜不会使用，激发波长选择错误。
免疫组化，是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。 病理实验免疫组化专业设备，真实实验结果。
—20℃）冻存——应选较佳稀度冻存。③若工作浓度大于1∶500则要先将原液稀释十倍，而后分装10μl/瓶→冻存（-20℃）于冰箱备用。④关于Ab保存应参照说明书。（3）Ab浓度的选择Ab浓度不可太高或太低，因为Ag-Ab结合需在一定浓度范围内进行，若一方过剩则形成复合物小且少；极过剩时已形成的复合物亦会解体而呈现假阴性。——并非Ab浓度越高越好。3．Ab滴片技术——所滴的抗体应与切片上的组织刚好吻合。[注意]滴抗体前需把切片上的水弄干，但不能干片。要领：甩净组织周围的水。4．PBS洗涤技术（1）洗涤的目的①保证离子浓度和PH值。②减少非特异反应（平时Ab不可靠很纯）（2）方法：洗三次，每次5分钟。5．Ab孵育技术（1）必须在湿盒内进行，以防抗体的蒸发和干片。（2）温度与时间4℃：过夜；37℃：2hor参考说明书6．光镜控制显色方法（1）室内操作：注意温度与时间的关系，室温较宜5分钟。（2）染色稍浅亦可拿出，脱水，封片后颜色可加深。对照组和染色结果的评价从以下几个方面综合评价：1．阳性染色特点①Ag定位，胞浆、胞核、胞膜、间质具有结构性。（非特异性～细胞与组织无区别）②染色强度不同：颜色深浅不一。免疫组化服务性价比高周期短。黑龙江免疫学免疫组化实验
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冰冻切片是借助低温冷冻将活检组织快速冻结达到一定的硬度进行制片的一种方法，手术中等待冰冻快速病理报告，以病变性质而决定手术方式和范围。而及时、准确的发出报告需要高质量的冰冻切片，鉴于冰冻切片常出现染色模糊不清的现象，对病理判断造成困难，甚至造成误诊或漏诊，实践中我们发现和组织固定、染色时返蓝有一定关系，为了提高冰冻制片质量，我们将FAA、Bouin氏液、88酒精三种固定液作了比较，并在染色中加用促蓝液，认为用88酒精固定液及染色时加用促蓝液制作的冰冻切片质量较理想，山西IHC免疫组化公司哪家好
