值得注意的是,当发生两个或以上细胞混合的时候,检测结果看起来非常像细胞系的“遗传不稳定”——当一个细胞系存在亚群时,尤其是一些*细胞系,由于遗传不稳定的存在,在一些位点的STR特性会不同。因此经验丰富的分子**是非常重要的,他能够帮助分析复杂的电泳图谱(STR峰图),从而判断是否由于发生细胞系交叉污染而导致多等位基因情况。上海翼和应用生物,作为老牌的遗传技术服务公司,十年以上基因分型经验,可以帮你解决你的疑惑。《Stem Cell Research》杂志于2019年进入上海翼和生物的视野。STR鉴定数据库比对
上海翼和公司为客户提供基于qPCR技术的种系鉴定方案,选择人、小鼠、大鼠和仓鼠基因组中特异基因片段,设计引物和荧光探针,快速鉴定种系来源。该方案灵敏度和特异性高,可以检测样本中不同种系来源的细胞污染,当污染细胞占比> 5% 时,可被稳定检出。在PCR反应中,除了正向引物和反向引物外,还引入了第三个寡核苷酸序列,这是一个重大的进展。这个额外的序列,就是探针(Probe),它弥补了DNA结合染料的缺点。探针上有荧光修饰基团,可产生荧光信号。浙江鉴定公司上海翼和应用生物技术有限公司**是ATCC细胞系鉴定委员会成员,深得学界信任。
小师弟:如何根据细胞STR鉴定结果判断细胞系是否发生了交叉污染?如果存在细胞系之间发生交叉污染,而且鉴定用的细胞可能有两种以上的细胞系时,那么在进行STR位点检测的时候,多个位点会出现两个以上的峰。峰高值表示该等位基因的信号强度,理论上峰值与样本的DNA浓度有直接的关系。因此,存在交叉污染的混合细胞系中,其中一个位点中某些峰会明显高于其他的峰,其中大峰是属于混合细胞系中那个主要细胞系,而小峰则属于那个次要细胞系。
翼和采用PCR 检测法,含有化学修饰热启动酶的 2×PCR mix,配以 dUTP 和UDG 酶,可很大程度降低非特异扩增和引物二聚体的形成,有效防止 PCR 产物的交叉污染。对细胞培养样本内支原体16S rRNA 基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测,与含有支原体的阳性标准品和不含有支原体的阴性标准品比对,鉴定支原体污染的现象,能够检测包含M.fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. salivarium, M. hominis, M.pulmonis, M. arthritidis, M. bovis, M. pneumoniae,M. pirum, M. capricolum, Acholeplasma, Spiroplasma等60多种支原体。翼和的STR图谱鉴包含细胞身份验证报告、STR等位基因表、电泳图、结果的解释与数据库比对结果。
翼和公司的近交系小鼠检测方案1.0与2.0版本(1)基于PCR-LDR的近交系小鼠检测方案1.0版本:该版本基于经典的PCR-LDR方案,由东华大学、中科院实验动物中心、上海实验动物研究中心多位**联合开发,并发表于《中国实验动物学报》。上海翼和进行二次开发后,推出市场,检测位点48个,分布于所有染色体上,能满足小鼠遗传背景基本需求。(2)基于多重PCR与二代测序的近交系小鼠检测方案2.0版本:2017年,上海翼和公司在多重PCR技术开发成熟的基础上,针对近交系小鼠,设计了100多个位点的二代测序方案,并在Ion Proton与IlluminaX-10上分别对数百只小鼠成功鉴定。依据该标准,可以通过多重荧光PCR技术,对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。STR鉴定数据库比对
本文所使用的Hela细胞,由上海翼和应用生物技术有限公司鉴定。STR鉴定数据库比对
上海翼和公司利用荧光PCR扩增小鼠基因组中9个STR基因位点,PCR产物在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测进行基因分型。根据所得的STR分型结果与细胞STR数据库(EXPASY)比对,从而鉴定样品所属的小鼠细胞系。2017年4月,翼和客户山东泰山医学院免疫所发表了EBioMedicine上的一篇论文,该文中编辑要求对突变小鼠的遗传背景进行鉴定,翼和公司应用基于多重PCR与二代测序的近交系小鼠检测方案2.0版本方案,成功的对基因编辑小鼠进行了测试,并对小鼠遗传背景进行了STR鉴定,杂志编辑成功接受。STR鉴定数据库比对
上海翼和应用生物技术有限公司主要经营范围是医药健康,拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。公司业务涵盖细胞组织小鼠质控,大健康检测,生物技术服务等,价格合理,品质有保证。公司注重以质量为中心,以服务为理念,秉持诚信为本的理念,打造医药健康良好品牌。在社会各界的鼎力支持下,持续创新,不断铸造***服务体验,为客户成功提供坚实有力的支持。
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