实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本较好常用、较好基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中推荐的组织标本制作方法。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
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非特异性染色弥散性均匀）2．组织切片制作过程的影响①固定不良—非特异性染色，显示不均。②边缘干燥—非特异性染色（常见），加抗体时勿干片。3．人工假象与特异性结果显示不在同一平面上。阳性对照：用已知抗原阳性的切片与待检标本同时进行免疫细胞化学染色。对照切片呈阳性结果，标为阳性对照。阴性对照：用确证不含已知抗原的标本作对照，应呈阴性结果，称阴性对照。其实这只是阴性对照中的一种，阴性对照还应包括空白、替代、吸收和***实验。▲染色失败的几种原因：（1）所染的全部切片均为阴性结果，包括阳性对照在内。全部（－）原因可能：①染色未完全严格按照操作步骤进行；②漏加一种抗体，或抗体失效；③缓冲液内含叠氮化钠，***了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤复染或脱水剂使用不当（2）所有切片均呈阳性反应，原因可能是：①切片在染色过程中抗体过浓，或干燥了。②缓冲液配置中未加氯化钠和PH值不准确，洗涤不彻底。③使用已变色的呈色底物溶液，或呈色反应时间过长。④抗体温育的时间过长。⑤H2O2浓度过高，呈色速度过快。粘附剂太厚。（3）所有切片背景过深，原因可能是：①未加酶消化处理切片。②切片或涂片过厚。③漂洗不够。浙江特殊染色免疫组化服务机构上海转录组技术比较好的公司找融享生物。
目的 比较抗原修复对多聚甲醛固定脑组织冰冻切片免疫组化结果的影响。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛经心腔灌注、固定后，分别经15%及30%蔗糖梯度脱水后进行冰冻切片（10μm），取相同部位切片20张，用兔抗Ach-M 2 受体多克隆抗体和小鼠抗DA-D 2 受体多克隆抗体作S-P免疫组化染色。 结果 经抗原修复的冰冻切片组的阳性结果比未经抗原修复组有明显提高。 结论 本实验次发现多聚甲醛固定的组织冰冻切片经抗原修复可以提高免疫反应敏感性或提升抗体效价。机制可能与多聚甲醛固定后对抗原有封闭作用有关。
根据标记物的不同，免疫细胞化学技术可分为免疫荧光细胞化学技术，免疫酶细胞化学技术，免疫铁蛋白技术，免疫金-银细胞化学技术，亲和免疫细胞化学技术，免疫电子显微镜技术等。近些年来，核酸分子原位杂交技术采用生物素、地高辛等非放射性物质标记探针，和免疫细胞化学技术密切结合，发展为杂交免疫细胞化学技术。不同的免疫细胞化学技术，各具有独特的试剂和方法，但其基本技术方法是相似的，都包括抗休的制备，组织材料的处理、免疫染色、对照试验、显微镜观察等步骤。还有双重和多重标记技术也有重要的用途。免疫组化专业技术比较好的公司找融享生物。
检测中的显色反应免疫组化显色是一种酶促反应，它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应，生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同，细胞分化不一，抗原含量不等，显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多，每步应按操作要求严格操作，脱蜡时间一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略，因PBS液内含有盐，可以减少背景染色。滴加试剂时要均匀、足够，要比切片上的组织界限宽出0.05~0.35cm防止出现边缘效应。即使是同一种抗体，由于产品批号不同，其效价可能有差异，因此，新购进的抗体一定要进行预实验，找出比较好条件并进行记录。此外，组织浸液的温度，切片烘烤的温度控制，实验操作过程中的室内温度及抗体的效价等都是影响免疫组化标记质量的重要因素。耐心细致的工作态度，标准化、规范化的操作，是完成实验的基本保证。上海免疫组化找融享生物科技有限公司。山西免疫组化公司电话
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芯片与常规切片免疫组化标记的比较 常规制片免疫组化阴性，而组织芯片免疫组化阳性者包括ER2例，PR1例;常规制片免疫组化阳性，而组织芯片免疫组化阴性者包括nm23、Her-2各1例。而部分病例常规制片免疫组化和组织芯片免疫组化阳性表达强度略有不同。组织芯片的免疫组化结果与常规制片免疫组化比较，统计学处理差异无显现性。3.3 规格组织芯片免疫组化效果的比较 在本观察中，使用1.0mm大小的组织芯进行免疫组化染色所得的结果和使用0.5mm组织芯所得结果一致，表明组织芯大小并不影响实验结果，关键是在组织芯片制作过程中认真观察原始常规切片，选取表示性区域并准确标记，在受体蜡块相应位置采取组织芯块。在同样面积的芯片，可以排列较多数量的小尺寸组织芯块，较容易包含大量研究病例安徽特殊染色免疫组化检测服务电话
