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免疫组化基本参数
  • 品牌
  • 融享
  • 公司名称
  • 上海融享生物科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物行业
  • 安全质量检测类型
  • 可靠性检测
  • 服务内容
  • 免疫组化
  • 所在地
  • 上海
  • 检测类型
  • 行业检测
  • 服务分类
  • HE染色
免疫组化企业商机

常用染色方法

根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法较好常用。判定分析编辑

免疫组化染色(IHC)

免疫组化染色(IHC)

从实验结果而言,免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结果的描述与分析,图片的确定与选取,相关数据的提供,上述工作是免疫组化工作的重点内容,只有严格的实验设计,标准的实验操作,专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求,这点对于形式为腹水,上清,培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在实验开始前由双方明确,一般而言,客户方实验前应提出需要什么样的结果与分析,例如是简要还是详细的描述实验结果,需要实验数据否,图片的数量与规格等。如果为双盲试验或有第三方参与,则事先申明。


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免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显示剂通过借助显微镜的观察,从而在抗原抗体结合部位确定组织细胞结构的一门组化技术。在病理诊断、基础医学研究工作中免疫组化技术已成为非常重要的手段。免疫组化显色是一种酶促反应,它通过连结在抗原抗体复合物上的过氧化物酶或碱性磷酸酶与底物DAB发生反应,生成有色的复合物沉淀在组织细胞中的抗原部位。由于标本组织来源不同,细胞分化不一,抗原含量不等,显色反应所需时间不可能完全一致。整个免疫组化过程步骤较多,每步应按操作要求严格操作,脱蜡一定要充分。每步PBS冲洗时间、次数一定不能省略,因PBS液内含有盐,浙江组织免疫组化检测服务电话融享生物为您提供一个专业的技术服务,吊炸天的免疫组化。

众所周知,冰冻切片较突出的优点就是能够较完好地保存抗原的免疫活性  ,即具有抗原敏感性高的优点  。因此对冰冻切片通常不进行抗原修复 ,而在作免疫组化的研究时往往需要对组织进行固定,固定液(如多聚甲醛、福尔马林)使组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,使得不少抗原决定簇被封闭。同时,由于甲醛的聚合作用,使蛋白分子间相互交联形成大分子网络,也导致了抗原有一定的封闭作用  ,从而降低了抗原敏感性。考虑到以上原因,我们对冰冻切片进行高温高压抗原修复并作对比研究。

封片

为了长期保存,我们一般用中性树胶等封片,避免产生气泡,方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液,然后一手拿住盖片某一拐角,而另一手拿对面的那个拐角,接近封片液近端的拐角先降低,直至接触到液体时为止;当发现液体接触面在不断弥散时,则可以缓慢降低另一拐角,这样一般不会产生气泡。免疫荧光方法中的重要环节

1)冰冻切片制备

建议用新鲜组织,否则组织细胞内部结构破坏,易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等,防止裂片和脱片严重。


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复染

目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位,经常用苏木素复染(胞核染料)。注意苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况,一般数秒-数分钟,胞浆蛋白可以适当时间长一点,而胞核算白则要短。不过这个如果染色不理想可以补救的。方法是:染色深则分化时间稍长些即可;染色浅则再置于苏木素中染色即可。盐酸酒精是分化,氨水是返兰。作用不同。片子复染完后流水振洗,然后置于盐酸酒精中数秒(一定动作要快)后拿出流水振洗,在放入氨水中返兰即可。


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临床资料 31例乳腺患者均为女性,年龄26~62岁,中位年龄49岁。病程5天~18个月。其中浸润性导管23例,浸润性小叶*6例,粘液2例。肿块比较大径1.4~6.5cm。


2.2 组织芯片质量 自行设计和制做的组织芯片能够满足观察研究的要求,但由于为手工所制,组织芯排列不够整齐,且0.5mm直径组织芯在HE染色和免疫组化染色过程中易发生位置滑动,并有少量脱片。


2.3 组织学检查 乳腺浸润性导管细胞异型性较显现,胞质丰富,红染、淡红染或透明,核大,核仁明显,核分裂像易见,成不规则条索、巢状、片状排列,可见腺样结构。浸润性小叶**细胞较小,相互间粘附性差,稍松散,常呈单排列样浸润于胶原纤维束间,围绕正常导管呈同心圆状排列,部分病例见小巢状、腺泡状结构。粘液腺*见小簇细胞成腺状、小巢状散在漂浮于粘液湖中。


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