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免疫组化基本参数
  • 品牌
  • 融享
  • 公司名称
  • 上海融享生物科技有限公司
  • 行业类型
  • 生物行业
  • 安全质量检测类型
  • 可靠性检测
  • 服务内容
  • 免疫组化
  • 所在地
  • 上海
  • 检测类型
  • 行业检测
  • 服务分类
  • HE染色
免疫组化企业商机

经验总结编辑

做过病理实验的人都知道,实验看似容易,但真想把它做好,还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有6年多了,在这段时间里,我做过许许多多病理相关实验,刚开始啥也不懂,一味按照网上操作流程来做,但做的结果往往并不是十分理想,较好终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习,从一些在论坛内学习、请教,并结合实践操作,我经历了初级——查找资料和摸索方法;中级——问题求助和不断总结;高级——难题解答和经验分享这三个阶段,也学到了不少知识,积累了很多宝贵经验,与大家一起分享下。

关于掉片

HE、Masson、番红O、Nissl、Mallory等染色方法很少有掉片现象;免疫组化和细胞凋亡检测我们采用专门购买的防脱片,由于整个实验流程比较长,在实验过程中产生掉片是很正常的现象。对于容易掉片的组织,如:骨组织、脑组织、皮肤组织等掉片有时候是不可避免的。


病理实验 免疫荧光,HE染色服务实验找融享生物。内蒙古免疫学免疫组化检查机构

这些常用免疫组织化学方法的原理如下:

1. 免疫荧光细胞化学技术

将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.

2. 免疫酶细胞化学技术

是免疫组织化学研究中较好常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究.

3. 免疫胶体金技术

就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究


天津动物实验免疫组化技术病理实验免疫组化专业设备,真实实验结果。

    —20℃)冻存——应选较佳稀度冻存。③若工作浓度大于1∶500则要先将原液稀释十倍,而后分装10μl/瓶→冻存(-20℃)于冰箱备用。④关于Ab保存应参照说明书。(3)Ab浓度的选择Ab浓度不可太高或太低,因为Ag-Ab结合需在一定浓度范围内进行,若一方过剩则形成复合物小且少;极过剩时已形成的复合物亦会解体而呈现假阴性。——并非Ab浓度越高越好。3.Ab滴片技术——所滴的抗体应与切片上的组织刚好吻合。[注意]滴抗体前需把切片上的水弄干,但不能干片。要领:甩净组织周围的水。4.PBS洗涤技术(1)洗涤的目的①保证离子浓度和PH值。②减少非特异反应(平时Ab不可靠很纯)(2)方法:洗三次,每次5分钟。5.Ab孵育技术(1)必须在湿盒内进行,以防抗体的蒸发和干片。(2)温度与时间4℃:过夜;37℃:2hor参考说明书6.光镜控制显色方法(1)室内操作:注意温度与时间的关系,室温较宜5分钟。(2)染色稍浅亦可拿出,脱水,封片后颜色可加深。对照组和染色结果的评价从以下几个方面综合评价:1.阳性染色特点①Ag定位,胞浆、胞核、胞膜、间质具有结构性。(非特异性~细胞与组织无区别)②染色强度不同:颜色深浅不一。

免疫组织化学(Immunohisochemistry)检测技术曾被公认为病理学发展史上的第二个里程碑,此项技术发展到现在,较好充实了病理学的内容,使病理诊断结果更精确,将病理学提高到了形态和功能相结合的水平。免疫组织化学方法的敏感性和特异性直接影响诊断结果的准确性。近两年来,在本科同志的配合下,笔者已做免疫组化420例,取得了很好的效果,并且明显的提高了诊断结果的准确性,支持了对临床病人的诊疗。现提出以下五点供同道借鉴融享生物是免疫组化,切片技术服务商之一,从事转录组测序/mRNA测序已经多年。

意义编辑

近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:

⑴恶性的诊断与鉴别诊断;

⑵确定转移性恶性的原发部位;

⑶对某类进行进一步的病理分型;

⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;

⑸发现微小转移灶,有助于临床方案的确定,包括手术范围的确定。

⑹为临床提供方案的选择。



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实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。


其中石蜡切片是制作组织标本较好常用、较好基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中推荐的组织标本制作方法。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。


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