目标区域甲基化重测序（Hi-MethylSeq），又叫重亚硫酸盐扩增子测序（Bisulfite Amplicon Sequencing， BSAS）。在前期全基因组甲基化测序、全基因组甲基化芯片等工作基础上，或者依据文献报道目的基因甲基化与性状/疾病关联，选择感兴趣的目的区间或候选基因，利用Hi-MethylSeq技术对大规模群体的候选基因甲基化水平进行检测。Hi-MethylSeq技术通过亚硫酸氢盐（bisulfite）处理，用多重PCR扩增目的片段，添加barcode和测序通用接头，在Illumina X10二代测序平台对PCR产物进行高通量测序，利用生物信息学方法，精确定量计算目标区间内的甲基化位点的甲基化状态，在完成目标区域检测的同时大幅降低研究费用。DNA甲基化是DNA化学修饰的一种形式，能够在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现。北京目标甲基化重测序
表观遗传学研究已经证实了特定基因区域的DNA甲基化修饰对于染色体构象、基因表达调控机制有着重要影响，而全基因组DNA甲基化研究将是表观基因组学为关注的内容之一。Bisulfite处理能够将基因组中未发生甲基化的C碱基转换成U，进行PCR扩增后变成T，与原本具有甲基化修饰的C碱基区分开来，再结合高通量测序技术，可绘制单碱基分辨率的全基因组DNA甲基化图谱。特定物种的高精确度甲基化修饰模式的分析，必将在表观基因组学研究中具有里程碑式的意义，并且为细胞分化、组织发育等基础机制研究，以及动植物育种、人类健康与疾病研究奠定基础。浙江目标区段甲基化重测序哪里好表观遗传学研究已经证实了特定基因区域的DNA甲基化修饰对于染色体构象、基因表达调控机制有着重要影响。
DNA甲基化一般是指DNA复制后，在DNA甲基转移酶的作用下，将S-腺甘酰甲硫氨酸分子上的甲基转移到DNA分子中胞嘧啶残基的第5位碳原子上，形成5-甲基胞嘧啶的过程，它是真核细胞生物基因组重要的修饰方式之一。DNA甲基化包括从头甲基化和维持甲基化2种模式。从头甲基化是指在从未发生甲基化的位点上发生甲基化修饰，建立DNA甲基化的过程；而维持甲基化是指维持甲基化的酶可识别新合成的半甲基化双链DNA，并将甲基添加到新链的非甲基化胞嘧啶上。
WGBS（Whole Genome Bisulfite Sequence）全基因组甲基化测序，利用重亚硫酸氢盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶(C)脱氨基转变成尿嘧啶(U)，而甲基化的胞嘧啶保持不变，然后通过PCR将U变为A，*有甲基化的C可以成功保留，***通过测序就可判断CpG位点是否发生甲基化。特点是精确度高、重复性好，检测范围广，可以覆盖全基因组范围内的每一个C碱基的甲基化状态；但需要的数据量比较大，成本较高。上海翼和生物是上海市遗传学会理事单位，上海市****，至今已有16年的历史。重亚硫酸盐扩增子测序法基于非甲基化胞嘧啶（C）向尿嘧啶（U）的化学转化，即用重亚硫酸盐处理基因组DNA。
5甲基胞嘧啶 (5-methylcytosine, 5mC) 是一种常见的DNA修饰类型，能调节基因表达、转座子及染色体的状态等。全基因组重亚硫酸盐转化的WGBS法，能够实现单碱基分辨率的甲基化位点准确、高效定位。通过***分析不同处理方式下的全基因组甲基化水平，快速准确鉴定出差异甲基化区域，有助于我们更加***深入地了解动、植物的甲基化模式和表观调控机制，在动物行为、植物胁迫、植物性状、胚胎发育、cancer疾病、生物标记物等方面具有普遍的应用。异常的DNA甲基化可参与调控疾病相关的分子信号通路,从而影响其正常功能。成都亚硫酸盐甲基化重测序公司
5 位C 甲基化的胞嘧啶脱氨基生成胸腺嘧啶, 由此可能导致基因置换突变, 发生碱基错配: T2G。北京目标甲基化重测序
DNA甲基化即在DNA上增加甲基基团，是使基因的转录抑制或沉默的主要方式。该修饰特异性地发生在CpG位点，胞嘧啶通过磷酸盐与鸟苷酸连接(图1)。甲基基团的插入改变了DNA的表观和结构，可能会直接阻碍DNA的识别及与转录因子的结合，或者吸引其他因子优先与DNA结合，干扰转录因子的结合。目前已鉴定了三个与甲基化DNA结合的蛋白家族，包括MBD蛋白、Kaiso和Kaiso样蛋白、以及SRA蛋白。通过招募这些蛋白，DNA甲基化可促进某些组蛋白状态的维持，如去乙酰作用，从而保持转录后的组蛋白修饰。例如，MBD家族的甲基CpG结合蛋白2(MeCP2)与甲基CpG结合，招募HDACs，可促使染色体浓缩和转录抑制。北京目标甲基化重测序
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