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理论上讲,SNP既可能是二等位多态性,也可能是3个或4个等位多态性,但实际上,后两者非常少见,几乎可以忽略。因此,通常所说的SNP都是二等位多态性的。这种变异可能是转换(C T,在其互补链上则为G A),也可能是颠换(C A,G T,C G,A T)。转换的发生率总是明显高于其它几种变异,具有转换型变异的SNP约占2/3,其它几种变异的发生几率相似。Wang等的研究也证明了这一点。转换的几率之所以高,可能是因为CpG二核苷酸上的胞嘧啶残基是人类基因组中,易发生突变的位点,其中大多数是甲基化的,可自发地脱去氨基而形成胸腺嘧啶。在基因组DNA中,任何碱基均有可能发生变异,因此SNP既有可能在基因序列内,也有可能在基因以外的非编码序列上。总的来说,位于编码区内的SNP(coding SNP,cSNP)比较少,因为在外显子内,其变异率*及周围序列的1/5.但它在遗传性疾病研究中却具有重要意义,因此cSNP的研究更受关注。多重PCR是将多个目标区段/目标SNP位点的在1个PCR管中同时扩增,获得多个目标片段的技术。广州同源SNP分型准确度高

两条高度相似的序列可能不存在同源性;同样的,同源序列的相似性也可能很低。例如两条同源序列的相似性比对结果不明显,但如果它们在结构上相似性上明显,或者它们都与第三条序列的相似性明显,那么它们显然是同源序列。因此,当相似性搜索发现统计学上显着的匹配时,我们可以放心地推断出这两个序列是同源的。但是,如果在数据库中找不到翼和生物研发和改良了适用于荧光定量PCR、一代测序和二代高通量测序平台的多种检测技术和产品,逐步形成了在细胞组织和动物模型质控、大健康检测和科学研究3大板块产品布局。统计上显着的匹配项,则不能确定没有同源物。南京同源SNP分型公司高同源序列带来的直接挑战:同源序列的干扰,无法利用简单PCR技术或者探针杂交捕获技术,将目标区段富集。

旁系同源基因(paralogousgene)又译为“横向同源基因”、“并系同源基因”或“平行进化同源基因”,是指由于基因复制而产生的同源基因,例如人γ一珠蛋白基因和β一珠蛋白基因。基因复制后,进化选择压力变小,其中一条基因丢失或发生沉默,都能促使旁系同源基因分化,产生新特性或新功能的原因。然而,虽然某些旁系同源基因转录区序列相似度不高,但它们的操纵子却仍然具有较高的保守度。值得注意的是,旁系同源基因并不局限于同一物种内,不同物种中由于始祖基因的复制而分化的基因也称旁系同源基因,如鼠α一珠蛋白和鸡β一珠蛋白基因。随着时间的推移,它们在序列组成和功能上可能会变得不同。

多序列比对的意义:用于描述一组序列之间的相似性关系,以便了解一个基因家族的基本特征,寻找motif,保守区域等。用于描述一个同源基因之间的亲缘关系的远景,应用到分子进化分析中。多序列比对的方法:同源性分析中常常要通过多序列比对来找出序列之间的相互关系,和blast的局部匹配搜索不同,多序列比对大多都是采用全局比对的算法。这样对于采用计算机程序的自动多序列比对是一个非常复杂且耗时的过程,特别是序列数目多,且序列唱的情况下。多重长片段巢式PCR技术,对几个几十个高同源SNP位点、大量样本的分型项目都适用。

Hi-SNP结合多重PCR技术和高通量测序技术,对需要检测的位点设计特异性引物,在单管内进行多重PCR扩增,不同的样本以不同的Barcode引物区分。混合样本后,在Ion Proton/Ion Torrent平台上,对扩增子进行高通量测序。测序结果使用生物信息学方法,区分不同的样本,,终获得每个位点的SNP信息。高通量测序能一次对几百万条DNA分子进行序列测定,相比其他的SNP检测技术,基于高通量测序的SNP分型具有更准确、更灵敏的特点。上海翼和生物提供高同源区段SNP分型服务。


普通的二代测序SNP分型,利用生信分析手段剔除HSVs、PSVs,难度比较高。南京高同源序列SNP分型报告

.多重长片段PCR扩增特异性序列,其产物可以作为后续SNP分型的模板。广州同源SNP分型准确度高

在研究亲缘关系较远的物种时,物种分化和基因重复的嵌套发生使研究具有很大的复杂性和困难度。这时,笼统的划分直系同源和旁系同源关系并不足以解决问题,我们需要一个更为精确的分类。为了区别于B1和C1的简单的直向同源关系,把B2和C2/C3的同源称为“共生直向同源”co—ortholog)或“横向同源基因家族谱系特异性扩充”(1ineage—specificexpansionofparalogousfamily)。为了区分C2和C3、B1和C2/C3这两种同源关系,可以根据物种分化和基因重复的发生的先后次序,把旁系同源基因又分为内旁系同源基因(inparalog)和外旁系同源基因(outparalog)。在物种分化之后产生旁系同源基因的称“内旁系同源基因”;在物种分化之前产生横旁系同源基因的称“外旁系同源基因”。“内旁系同源基因”和“外旁系同源基因”只是一种相对的划分,取决于所研究的系统和选作标准的某特定分化事件。若以第二次物种分化为准线,则C2和C3的分离发生在物种分化之后,因此它们互为内旁系同源基因;B1和C2/C3的分离发生在物种分化之前,因此B1和C2/C3互为外旁系同源基因。广州同源SNP分型准确度高

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