二代测序法主要通过PCR的方法，对目标SNP位点进行特异性捕获。为了提**型的通量，目前多采用多重PCR的方法同时对多个位点进行捕获（可同时对1-100位点进行分型）。由于二代测序通量是足够满足数百数千样本的同时测序，因此需要对不同的样本添加***的样本标签（Barcode），从而在后续数据分析过程中，能够进行样本拆分。因此在多重PCR完成***轮多SNP位点捕获后，需要进行第二轮PCR，在***轮PCR产物的基础上，添加样本样本标签及测序接头等序列。通过PCR条件优化，目前亦可实现一次反应，两轮PCR接力完成的效果。多重PCR是将多个目标区段/目标SNP位点的在1个PCR管中同时扩增，获得多个目标片段的技术。江苏高同源序列SNP分型
Hi-SNP结合多重PCR技术和高通量测序技术，对需要检测的位点设计特异性引物，在单管内进行多重PCR扩增，不同的样本以不同的Barcode引物区分。混合样本后，在Ion Proton/Ion Torrent平台上，对扩增子进行高通量测序。测序结果使用生物信息学方法，区分不同的样本，，终获得每个位点的SNP信息。高通量测序能一次对几百万条DNA分子进行序列测定，相比其他的SNP检测技术，基于高通量测序的SNP分型具有更准确、更灵敏的特点。上海翼和生物提供高同源区段SNP分型服务。
天津高同源区段分型准确度高目前在nature genetics和cell这样的杂志，也不乏SNP的文章。
连接酶检测反应(LigaseDetectionReaction，LDR)是利用高温连接酶实现对基因多态性位点的识别，高温连接酶一旦检测到DNA与互补的两条寡聚核苷酸接头对应处存在着基因点突变类型的碱基错配，连接反应就不能进行。该方法，对SNP位点同时设计两条有长度差异的探针，当探针末端与模板有一个碱基不配对，所以连接反应不能进行，没有连接产物；相反，若探针与模板DNA完全互补，故进行连接反应，通过温控循环，该特异性连接反应可反复进行，达到线性扩增的效果。，后通过荧光扫描片段长度，实现对SNP位点的检测。
上海翼和生物根据具体实验规模，提供两种检测平台，分别为：适合中低通量检测的PCR-LDR分型服务和适合高通量的基于二代Hi-SNP分型服务。PCR-LDR SNP分型服务：PCR-LDR技术是PCR技术和LDR(Ligase Detection Reaction,连接酶检测反应)想结合的检测技术。LDR是利用高温连接酶实现对基因多态性位点的识别。高温连接酶一旦检测到DNA与互补的两条寡聚核苷酸接头对应处存在着基因点突变类型的碱基错配，则连接反应就不能进行，反之则可以进行连接反应。Hi-SNP结合多重PCR技术和高通量测序技术，对需要检测的位点设计特异性引物，在单管内进行多重PCR扩增，不同的样本以不同的Barcode引物区分。混合样本后，在illumina 等主流测序平台上，对扩增子进行高通量测序。测序结果使用生物信息学方法，区分不同的样本，，终获得每个位点的SNP信息。高通量测序能一次对几百万条DNA分子进行序列测定，相比其他的SNP检测技术，基于高通量测序的SNP分型具有更准确、更灵敏的特点。目前已有多种方法可用于SNP检测，如根据动态等位基因特异的杂交、DNA芯片以及TaqMan系统等。
SNP指的是DNA序列上发生的单个核苷酸碱基之间的变异。SNP根据所处核酸位置不同，其预测的生物学功能不同，可以分为有***生物学意义和无***生物学意义的SNP。有生物学意义的SNP往往影响蛋白结构，表达，剪切等。上海翼和应用生物技术有限公司是上海市遗传学会理事单位，至今已有十六年历史，专注于为国内科研工作者和生物医药企业提供各类分子遗传学技术服务和质控试剂盒。基于自主知识产权的多重PCR技术，翼和生物研发和改良了适用于荧光定量PCR、一代测序和二代高通量测序平台的多种检测技术和产品，逐步形成了在细胞组织和动物模型质控、大健康检测和科学研究3大板块产品布局。利用长片段PCR扩增获得特异性片段后，可以采用一代测序、等位基因特异性PCR、CAPs等方法进行SNP分型。江苏同源序列SNP分型
只要这个突变群没有达到总群体的1%，它就只是一个突变株/系。达到了1%就是多态性了。江苏高同源序列SNP分型
TaqMan荧光探针法优点是操作简单，准确性高（闭管进行，减少污染），判读也很方便，认可度高；适合多样本，少位点。但是其也有不可忽视的限制性，如探针合成耗时较长，价格昂贵，为了保证探针的稳定质量，一般大家会选择A公司合成。TaqMan荧光探针法一般为只有几个位点时适用，并且对样本的质量要求较高，除了样本无降解外，要需要浓度尽可能的一致。上海翼和应用生物技术有限公司，地址：上海市松江区龙腾路1015弄中星创意园2号502江苏高同源序列SNP分型
上海翼和应用生物技术有限公司致力于医药健康，是一家服务型公司。公司业务分为细胞组织小鼠质控，大健康检测，生物技术服务等，目前不断进行创新和服务改进，为客户提供良好的产品和服务。公司秉持诚信为本的经营理念，在医药健康深耕多年，以技术为先导，以自主产品为重点，发挥人才优势，打造医药健康良好品牌。翼和生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念，全力打造公司的重点竞争力。
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