DNA甲基化是表观遗传学领域研究的重点之一。DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase, 缩写DNMT）的作用下，基因组DNA序列上CpG岛的二核苷酸5′端胞嘧啶转变为5′甲基胞嘧啶（5′ methylcytosine, 缩写5mC）。这种DNA修饰的方式并未改变基因的序列, 但能改变某些基因的表达，从而影响生物学功能。DNA 甲基化参与众多的细胞生命活动，包括细胞分化、组织特异性基因表达、基因组印记、X 染色体失活等。异常的 DNA 甲基化会导致发育异常、tumour等疾病的发生。DNA甲基化是一种表观遗传修饰，是由DNA甲基转移酶催化S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine)作为甲基供体.杭州目标位点甲基化重测序公司
上海翼和生物甲基化测序采用的是重亚硫酸盐扩增子测序法（Bisulfite Amplicon Sequencing， BSAS），重亚硫酸盐转化是研究DNA甲基化的金标方法，该技术基于非甲基化胞嘧啶（C）向尿嘧啶（U）的化学转化，即用重亚硫酸盐处理基因组DNA，非甲基化胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化胞嘧啶不发生这种转化，从而能够在单核苷酸水平上确定DNA甲基化（图1）。转化后的序列可以进行多种分析，包括重亚硫酸盐测序、焦磷酸测序、甲基化特异性PCR、高分辨率熔解曲线分析、基于微阵列的方法和下一代测序。南京bisulfite甲基化重测序怎么解决亚硫酸氢盐处理是一种分类5-甲基胞嘧啶和非甲基化碱基的有效方法之一。
DNA甲基化是表观遗传学修饰的主要形式，甲基化模式的异常促进细胞恶性转化，参与tumour演进。许多基因具有tumour特异性的甲基化表型，一方面基因组普遍的低甲基化引起原cancer基因活化，基因组不稳定性增加；另一方面启动子区的高甲基化，引起抑cancer基因及错配修复基因表达沉默，导致tumour的发生。研究表明，基因组的低甲基化随着细胞恶性度的增加而愈加明显，是病情诊断的重要指标；此外，CpG岛局部的高甲基化发生于细胞恶变之前，能在早期预测tumour的发生，其也能有效地预测tumour的复发和转移，在tumour的鉴别诊断中亦发挥重要作用。因此，检测tumour发生中相关基因的甲基化模式具有重要意义，现就近年来中外文献报道的甲基化检测方法进行简要的分析总结。
DNA（主要是CpG的）甲基化是其遗传机制和表型效应**为明确的表观遗传性机制。DNA甲基化谱式的变化不仅指导在正常发育过程中细胞谱系特化所依据的基因组转录谱式的改变，且在疾病发生和发展的基因表达异化中起着决定性的作用。为了高效准确的分析基因组中所有的甲基化位点，可采用全基因组甲基化（Whole Genome Bisulfite Sequence，WGBS）。亚硫酸氢盐处理是一种分类5-甲基胞嘧啶和非甲基化碱基的有效方法之一，包括基于序列、熔化温度和交互的分析，WGBS是通过重亚硫酸氢盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶（C）脱氨基转变为尿嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶保持不变，再经PCR将U转变为T，结合NGS便可高效准确地分析基因组中所有甲基化位点。重亚硫酸盐测序本质上就是重亚硫酸盐转化与二代测序（NGS）的结合。
DNA甲基化作为一种重要的表观修饰，在调控基因的时空特异性表达中扮演着关键的角色，参与了X染色体失活、基因组印记和重复序列抑制等诸多生命过程。哺乳动物细胞的DNA甲基化主要发生在CpG二核苷酸对的C（胞嘧啶）上，并在有丝分裂过程中得以相对稳定的维持，这对细胞保持谱系特性有着重要的意义。上海翼和应用生物技术有限公司自主研发的Hi-MethylSeq技术，可对对大规模群体的候选基因甲基化水平进行检测。上海翼和生物是上海市遗传学会理事单位。重亚硫酸盐测序可以从单个碱基水平分析基因组中甲基化的胞嘧啶。苏州甲基化重测序分析
以MethlyC-seq为例，将DNA段化后收集特定长度的片段并修复DNA末端.杭州目标位点甲基化重测序公司
目标区域甲基化重测序（Hi-MethylSeq），又叫重亚硫酸盐扩增子测序（Bisulfite Amplicon Sequencing， BSAS）。在前期全基因组甲基化测序、全基因组甲基化芯片等工作基础上，或者依据文献报道目的基因甲基化与性状/疾病关联，选择感兴趣的目的区间或候选基因，利用Hi-MethylSeq技术对大规模群体的候选基因甲基化水平进行检测。Hi-MethylSeq技术通过亚硫酸氢盐（bisulfite）处理，用多重PCR扩增目的片段，添加barcode和测序通用接头，在Illumina X10二代测序平台对PCR产物进行高通量测序，利用生物信息学方法，精确定量计算目标区间内的甲基化位点的甲基化状态，在完成目标区域检测的同时大幅降低研究费用。杭州目标位点甲基化重测序公司
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