DNA甲基化（DNA methylation）为DNA化学修饰的一种形式，能在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表观。 DNA甲基化在维持细胞正常功能、传递基因组印记，胚胎发育、tumour发生等方面发挥重要作用，目前已经成为表观遗传学和表观基因组学的研究热点。DNA甲基化测序可在全基因组水平上比较大限度的、完整的获取甲基化状态信息和与基因表达调控的多重关系，可高效精确完成全基因组甲基化测序及*分辨DNA甲基化谱式绘制，并可对发现的靶点区进行甲基化特异性PCR验证。Hi-MethylSeq在研究DNA甲基化时，每一个read都相当于克隆测序时的一个单克隆。江苏目标区间甲基化重测序哪里做
DNA甲基化可以抑制基因表达。其机制是当DNA甲基化出现在启动子区，其会强化启动子序列的异染色质化（染色体拧巴在一起），而使转录起始复合物无法接近和结合，从而强化基因的转录抑制。只有保持开放性常染色质状态的转录起始位点，才能保证转录起始蛋白复合物可接近并结合这个区域，从而保证基因的转录表达。当DNA甲基化出现在编码基因不同区域的时候（上游，基因区或下游），其对基因表达的影响也是不同的。同时，DNA甲基化不仅只影响基因转录，实际上其与组蛋白修饰、DNA突变、小RNA表达等都有非常复杂的相互调控作用。广州目标区段甲基化重测序报告重亚硫酸盐扩增子测序法基于非甲基化胞嘧啶（C）向尿嘧啶（U）的化学转化，即用重亚硫酸盐处理基因组DNA。
DNA甲基化属于表观遗传的范畴。表观遗传属于一种可以对环境产生应答和改变的遗传机制。机体细胞在经历胁迫、创伤等环境变化后，会产生特定的应答，并往往会用DNA甲基化、组蛋白修饰等形式将应激的模式记录在DNA修饰中。这种胁迫记忆可以帮助细胞在面临下一次应激的时候快速适应。同时，这种表观修饰可以通过遗传的方式传递给下一代细胞。对于高等动植物，通常寿命都比较漫长。在漫长的一生中，一方面机体会经历大量的环境应答，另一方面细胞将会分裂多代。那么机体就更需要将应答的信息，存储在DNA甲基化中传递给后代的细胞，以提高这个物种的环境适应能力。
目标区域甲基化重测序（Hi-MethylSeq），又叫重亚硫酸盐扩增子测序（Bisulfite Amplicon Sequencing， BSAS）。在前期全基因组甲基化测序、全基因组甲基化芯片等工作基础上，或者依据文献报道目的基因甲基化与性状/疾病关联，选择感兴趣的目的区间或候选基因，利用Hi-MethylSeq技术对大规模群体的候选基因甲基化水平进行检测。Hi-MethylSeq技术通过亚硫酸氢盐（bisulfite）处理，用多重PCR扩增目的片段，添加barcode和测序通用接头，在Illumina X10二代测序平台对PCR产物进行高通量测序，利用生物信息学方法，精确定量计算目标区间内的甲基化位点的甲基化状态，在完成目标区域检测的同时大幅降低研究费用。DNA甲基化的位置主要集中在基因5′端的非编码区，DNA高度甲基化首先会影响DNA结构,引起基因沉默。
DNA甲基化是表观遗传学修饰的主要形式，甲基化模式的异常促进细胞恶性转化，参与tumour演进。许多基因具有tumour特异性的甲基化表型，一方面基因组普遍的低甲基化引起原cancer基因活化，基因组不稳定性增加；另一方面启动子区的高甲基化，引起抑cancer基因及错配修复基因表达沉默，导致tumour的发生。研究表明，基因组的低甲基化随着细胞恶性度的增加而愈加明显，是病情诊断的重要指标；此外，CpG岛局部的高甲基化发生于细胞恶变之前，能在早期预测tumour的发生，其也能有效地预测tumour的复发和转移，在tumour的鉴别诊断中亦发挥重要作用。因此，检测tumour发生中相关基因的甲基化模式具有重要意义，现就近年来中外文献报道的甲基化检测方法进行简要的分析总结。目标区域甲基化重测序（Hi-Methylseq）结合了亚硫酸盐转换、靶向扩增子高通量测序技术。河南亚硫酸盐甲基化重测序哪里好
Hi-Methylseq方案一次测序反应每个位点测序上百次节约时间、成本、定量准确。江苏目标区间甲基化重测序哪里做
DNA甲基化是研究 为普遍的表观遗传修饰，它被认为在许多生物学过程和疾病中有着重要的作用。随着测序技术的快速发展，二代测序与重亚硫酸盐处理基因组DNA相结合产生了可以在全基因组单碱基水平上测量DNA甲基化水平的全基因组重亚硫酸盐测序（whole-genome bisulfite sequencing，WGBS）技术。WGBS的流程与全基因组DNA测序主要区别于DNA文库的构建。以MethlyC-seq为例，将DNA 段化后收集特定长度的片段并修复DNA末端，再将双端加上3′-dAMP然后连接上甲基化的接头，接着用重亚硫酸盐处理DNA使未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U）， 终进行低循环数的PCR扩增后完成建库，建库完后上机测序，得到原始数据（fastq文件）后，完成一定的质量控制后就可以进行mapping分析。江苏目标区间甲基化重测序哪里做
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