旁系同源基因(paralogousgene)又译为“横向同源基因”、“并系同源基因”或“平行进化同源基因”,是指由于基因复制而产生的同源基因,例如人γ一珠蛋白基因和β一珠蛋白基因。基因复制后,进化选择压力变小,其中一条基因丢失或发生沉默,都能促使旁系同源基因分化,产生新特性或新功能的原因。然而,虽然某些旁系同源基因转录区序列相似度不高,但它们的操纵子却仍然具有较高的保守度。值得注意的是,旁系同源基因并不局限于同一物种内,不同物种中由于始祖基因的复制而分化的基因也称旁系同源基因,如鼠α一珠蛋白和鸡β一珠蛋白基因。随着时间的推移,它们在序列组成和功能上可能会变得不同。现阶段,异源多倍体物种的全基因组重测序已经可以通过各式各样的生信算法,SNP的质量也越来越好了。广州同源区段SNP分型准确度高
基因的直系同源、旁系同源或异源同源关系[1]。祖先物种通过两次物种分化形成ABC三个物种;伴随物种分化而进行的两次基因重复共形成A1、B1、B2、C1、C2、C3等6个基因。显然,C2与C3互为直系同源;B1与C1互为旁系同源;AB1与其他6个基因互为异源同源。然而,B1和B2、B2和C1又是什么关系呢?在这个问题上曾引起争议。B1和B2、B2和C1的分离是由于***次基因重复而产生的,套用定义,可得出B1和B2、B2和C1互为旁系同源。同理,B1和C2/C3、C1和C2/C3也互为旁系同源。类似的,根据直系同源基因的定义,B2和C2/C3、A1和所有B基因及C基因互为直系同源。天津高同源序列分型机构单核苷酸多态性(SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。
在研究亲缘关系较远的物种时,物种分化和基因重复的嵌套发生使研究具有很大的复杂性和困难度。这时,笼统的划分直系同源和旁系同源关系并不足以解决问题,我们需要一个更为精确的分类。为了区别于B1和C1的简单的直向同源关系,把B2和C2/C3的同源称为“共生直向同源”co—ortholog)或“横向同源基因家族谱系特异性扩充”(1ineage—specificexpansionofparalogousfamily)。为了区分C2和C3、B1和C2/C3这两种同源关系,可以根据物种分化和基因重复的发生的先后次序,把旁系同源基因又分为内旁系同源基因(inparalog)和外旁系同源基因(outparalog)。在物种分化之后产生旁系同源基因的称“内旁系同源基因”;在物种分化之前产生横旁系同源基因的称“外旁系同源基因”。“内旁系同源基因”和“外旁系同源基因”只是一种相对的划分,取决于所研究的系统和选作标准的某特定分化事件。若以第二次物种分化为准线,则C2和C3的分离发生在物种分化之后,因此它们互为内旁系同源基因;B1和C2/C3的分离发生在物种分化之前,因此B1和C2/C3互为外旁系同源基因。
上海翼和生物根据具体实验规模,提供两种检测平台,分别为:适合中低通量检测的PCR-LDR分型服务和适合高通量的基于二代Hi-SNP分型服务。PCR-LDR SNP分型服务:PCR-LDR技术是PCR技术和LDR(Ligase Detection Reaction,连接酶检测反应)想结合的检测技术。LDR是利用高温连接酶实现对基因多态性位点的识别。高温连接酶一旦检测到DNA与互补的两条寡聚核苷酸接头对应处存在着基因点突变类型的碱基错配,则连接反应就不能进行,反之则可以进行连接反应。Hi-SNP结合多重PCR技术和高通量测序技术,对需要检测的位点设计特异性引物,在单管内进行多重PCR扩增,不同的样本以不同的Barcode引物区分。混合样本后,在illumina 等主流测序平台上,对扩增子进行高通量测序。测序结果使用生物信息学方法,区分不同的样本,,终获得每个位点的SNP信息。高通量测序能一次对几百万条DNA分子进行序列测定,相比其他的SNP检测技术,基于高通量测序的SNP分型具有更准确、更灵敏的特点。高同源序列带来的直接挑战:同源序列的干扰,无法利用简单PCR技术或者探针杂交捕获技术,将目标区段富集。
目前市场上有多个厂家提供HRM分析的仪器,包括Idaho Technology、Corbett(QIAGEN)、Roche等,有些是**HRM的仪器,有些则是附带HRM功能的定量PCR仪。HRM的发明者—美国犹他大学医学院的Wittwer实验室曾评估了市场上多台仪器在基因分型和突变扫描上的性能1。他们发现,对于大部分仪器的准确基因分型来说,主要限制在于平板上的空间温度差异(Tm的标准偏差为0.020-0.264°C)。其它差异如数据密度、信噪比和熔解速率,也会影响杂合体的扫描。经过比较发现,空气加热型仪器以及样品温度单独控制的仪器有着更低的Tm标准偏差(0.018-0.065),而加热块型仪器则在0.092-0.274。在经济作物育种领域,检测SNP可实现对所需性状的早期选择。河南高同源序列分型准确度高
翼和生物利用自主研发的多重长片段CPR技术,结合巢式PCR技术,解决高同源区段SNP/序列分析难题。广州同源区段SNP分型准确度高
随着二代测序技术的普及,相比Sanger测序,以降低测序读长的前提,**增加的测序通量同时大幅降低测序成本。利用二代测序进行SNP分型,不仅测序读长满足分型需求,可以同时对数十数百个位点,上千样本进行分型。该方法相比直接测序法,除了保留测序法的优点外,弥补了其通量不足的限制,二代测序分型法也正在快速在领域内推广。上海翼和生物提供高同源SNP分型服务,无锡分公司(无锡翼和应用生物技术有限公司)地址:无锡市滨湖区梅梁西路138号七号楼一楼。广州同源区段SNP分型准确度高
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