芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾单分子ELISA检测试剂盒,多重超敏检测,多重指标也能检测到亚皮克级!医疗检测数字ELISA微量样本
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 芯弃疾数字ELISA产品芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,低可测试到亚皮克级;
芯弃疾JX-8B数字ELISA,我们为什么能做到?产品主要原理同单分子阵列技术:
非常近,已经描述了两种数字蛋白质测量方法,这些方法能够提高对单分子水平的灵敏度。一种方法依赖于在固相上形成免疫三明治复合物,然后化学解离并通过激光计数每个分子。第二种方法由美国开发,依赖于单分子阵列和同时计数单分子捕获微珠。这两种方法都能将检测能力的下限降低10倍或更多,与增强的模拟放大方法相比,但后者技术也易于与高通量自动化仪器兼容,用于ELISA试剂处理。通过使用大量微孔阵列,可以同时获取和查询数百到数万个数据点,实现快速数据采集和稳健统计。此外,从阵列中可能获得的快速数据采集可以应用于预编码具有不同荧光特性的多个微珠亚群,从而在单分子水平上实现高通量多重分析。
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单分子POCT产品,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;
低成本便捷检测:数字ELISA芯片,分为手动版和自动版,其中手动版可以直接使用移液枪加液检测;更少可以使用单片4孔芯片(同时做4个test)、8孔芯片(同时做8个test)进行检测;(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);芯片内只需要微量样本(10-20ul)即可完成检测,所需要的试剂量也明显降低,且每个芯片孔内可同时检测2-4个检测指标,分摊下来检测成本有效降低;其中自动版可搭配小型多通道加样仪,也可以进行高通量的ELISA芯片同时检测。1)检测快速:数字ELISA芯片高敏检测试剂盒,搭配预埋的磁珠和荧光量子点试剂,整体反应在芯片的微小流道内进行,反应速度快、清洗速度快;更短只需要15-20min,就可以进行完整的检测流程,接近POCT检测产品,可以有效节省您的实验时间。2)高灵敏检测数字ELISA高灵敏度检测芯片,使用单分子免疫检测的原理(原理同simoa等产品,使用反应微球单分散阵列排布的原理,将反应信号进行单分子单分散检测),在快速、便捷检测的同时,仍能保持高灵敏度,常规指标轻松达到0.2-1pg/ml的灵敏度 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,多重检测,同一样本就能测试2-6项指标;
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单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个生物实验室都能用的单分子检测;医疗检测数字ELISA
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芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品,与sioma产品的区别:
simoa产品为什么很难普及:主要问题:效果好、但成本高、平台庞大、不灵活、不开放;大部分实验室买不起设备!即使公用平台上了设备,大部分课题组也用不起耗材试剂!仪器:巨大,价格>300万;芯片+试剂:每套1万元以上;
Simoa的技术方案很难小型化,大部分反应流程都在芯片外进行,必须依赖大型自动化设备,与大部分生物实验室、医学实验室的灵活、低成本使用场景不符。 医疗检测数字ELISA微量样本