芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 微量样本超多重检测芯片兼容血清、血浆、房水等多种样本类型,应用场景广。单分子检测数字ELISA检测通量
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将约5cm长的光纤束依次抛光使用30微米、9微米和1微米尺寸的金刚石研磨膜的机器。抛光光纤在0.025M盐酸溶液中化学蚀刻130秒,然后立即浸入水中以抑制反应。蚀刻后的光纤在水中复溶5秒,在水中洗涤5分钟,然后在真空下干燥。光纤束阵列的中心玻璃和包层玻璃的蚀刻速率差异caused4.5-μmdiameter孔在中心光纤中形成30。更初研究了不同蚀刻时间对孔深的影响。如果孔太深,则每个孔中沉积多个微珠。井口密封性被破坏;如果井口太浅,则无法将微球保留在井内,且观察到加载效率较差。对于单个微球而言,井口深度of3.25±0.5μm是比较好的,同时保持良好的密封性。 IVD数字ELISA精密度芯弃疾JX-8B数字ELISA,多重检测,同一样本就能测试2-6项指标;
急诊标志物检测:POCT芯片的性能突破,在急诊**标志物检测中,POCT芯片实现了灵敏度与速度的双重突破。针对心肌损伤标志物cTnI,其比较低检测限达10pg/ml,线性范围0-1000pg/ml,15分钟内即可出具结果,为急性心梗的早期排除与确诊提供了“黄金时间”内的关键数据。在***性疾病中,PCT检测灵敏度10pg/ml,覆盖0-3810pg/ml的临床关注区间,助力快速鉴别细菌***与病毒***,指导***合理使用。该芯片的小型化设计适配急诊床旁检测,配合自动化系统,可同时检测心肌酶、炎症因子、凝血指标等多个项目,为EICU、院前急救提供一站式检测解决方案,***提升危重症救治的时效性与准确性。
数字ELISA芯片的标准化生产与质量控制,依托自研的单分子PDMS芯片产线,数字ELISA芯片实现了从材料制备到成品质检的全流程标准化。硅模制备精度控制在±1μm,确保磁珠捕获结构的一致性;PDMS预聚体真空脱气处理消除气泡干扰,键合强度>3MPa保障反应体系密封。成品质检环节通过荧光显微镜与自动计数系统,对磁珠捕获率(>95%)、荧光背景值(<500RLU)进行100%全检,良品率稳定在98%以上。标准化生产流程不仅保障了芯片性能的批次间一致性,更通过SPC统计过程控制持续优化工艺,为临床大规模应用提供了可靠的质量保证,推动数字ELISA技术从实验室走向产业化。芯弃疾单分子芯片依托单分散阵列化技术,实现飞克级高灵敏检测,可捕获数十万反应磁珠。
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根据目标蛋白的抗体制备了功能化的微球生产商说明。含有目标蛋白的100-μL测试溶液与200,000个磁珠悬浮液孵育2小时至23°C。然后将磁珠分离并用PBS和0.1%Tween-20洗涤三次。磁珠重新悬浮后与含有检测抗体(通常约为1nM)的溶液孵育45分钟。在23°C下最小值。然后将珠子分别用PBS和0.1%洗涤三次。Tween-20。将珠子与含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分钟,然后分离并在PBSand0.1%Tween-20中洗涤六次。随后将珠子重悬于10μLofPBS中,并加载到飞升液位阵列中。整个实验的总时间约为~6小时。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物实验室都能用的单分子检测;单分子阵列数字ELISA配置灵活
芯弃疾芯片通过量子点阵列增强荧光信号,实现单分子级蛋白捕获与超敏检测。单分子检测数字ELISA检测通量
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由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 单分子检测数字ELISA检测通量