芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 全自动加样与图像分析系统实现检测流程自动化,荧光信号识别,结果可靠。高灵敏的数字ELISA高速检测

芯弃疾JX-8B数字ELISA,我们为什么能做到?产品主要原理同单分子阵列技术:
非常近,已经描述了两种数字蛋白质测量方法,这些方法能够提高对单分子水平的灵敏度。一种方法依赖于在固相上形成免疫三明治复合物,然后化学解离并通过激光计数每个分子。第二种方法由美国开发,依赖于单分子阵列和同时计数单分子捕获微珠。这两种方法都能将检测能力的下限降低10倍或更多,与增强的模拟放大方法相比,但后者技术也易于与高通量自动化仪器兼容,用于ELISA试剂处理。通过使用大量微孔阵列,可以同时获取和查询数百到数万个数据点,实现快速数据采集和稳健统计。此外,从阵列中可能获得的快速数据采集可以应用于预编码具有不同荧光特性的多个微珠亚群,从而在单分子水平上实现高通量多重分析。 科研数字ELISA多指标高通量芯片替代传统技术,快速初筛蛋白标记物,为疾病诊断提供多维依据。

芯弃疾JX-8B数字ELISA 具有超敏的优点:
检测方法为阵列成像。阵列成像涉及对阵列中的每个孔进行检测以确定是否存在微球并判断微球是否具有酶活性。为此,开发了一种图像分析软件,该软件首先创建一个阵列的“掩模”,以定义孔定位和边界进行检测。然后将孔掩模应用于阵列的荧光图像,以确定孔内微球和酶的存在。对于阵列的荧光图像,当进行多重检测时,会生成微球群体或微球亚群的荧光强度直方图。直方图中的峰值自动识别并用于确定微球群体。
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由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,少至可以进行8孔、4孔的灵活检测。

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人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个医学实验室都能用的单分子检测;科研场景用数字ELISA使用效果
使用现有平台就能做的单分子免疫检测;高灵敏的数字ELISA高速检测
微量样本超多重检测芯片:亚pg级灵敏度与高通量的协同创新,微量样本超多重检测芯片突破传统技术限制,单通道**多设计21个检测区,单个芯片并联8-16个**通道,检测速度达288-336测试/小时,性能媲美化学发光技术,灵敏度达亚pg级别。其“省样本、省耗材、省空间”优势***:5μl微量进样适配稀缺样本,21项指标共享一套耗材降低成本,桌面式扫描仪节省实验室空间。在**普查中,该芯片可同时筛查29种肺*标记物,筛选特异性>80%的组合(如CEA、SA、CA242),提高早期诊断准确性;在炎症因子检测中,对IL-1β、IL-6等低丰度细胞因子的检测线性范围宽泛,为疾病早期***筛查提供了高效解决方案,尤其适合大规模流行病学调查与个体化医疗中的多因子分析。高灵敏的数字ELISA高速检测