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2.3表面引发活性聚合法
表面引发活性活性聚合法是指通过一定的方法使自由基活性种键合到磁性粒子表面，然后引发单体聚合的一种方法，其比较大特点是可以控制聚合物分子量及得到窄分子量的聚合物，容易实现对磁性聚合物微粒粒径的均一可控以及聚合物层的厚度控制及功能化。常见的表面引发活性聚合法主要包括：氮氧稳定自由基(NMRP)、可逆加成断裂链转移聚合聚合法(RAFT)、原子转移自由基聚合法(ATRP)[21]、活性开环聚合等。
陈志军等采用化学共沉淀法合成了Fe3O4纳米粒子，然后用3-甲基丙稀酷氧基三甲氧基硅院(3-MPS)对其表面改性引入双键，然后以苯乙稀为卑体，4-经基-2,2,6,6-四甲基呢淀-1-氧化物自由基(HTEMPO)为稳定自由基介质，采用可控“活性”自由基聚合在纳米粒子表面原位引发聚合制备了粒径为20-30nm，磁含量为62.6%的磁性聚苯乙稀复合纳米粒子。
Qin先制备了含有RAFT链转移剂的S-节基-S’-三甲氧基桂基丙基三硫碳酸醋(BTPT),并对共沉淀法制备的Fe3O4纳米粒子表面进行改性得到表面负载RAFT试剂的磁性纳米粒子，然后在其表面引发聚乙二醇甲基丙稀酸酯聚合。由于表面聚乙二醇的生物相容性，其对牛血清蛋白，溶菌酶及球蛋白无特异性吸附，说明其在纳米颗粒在体内有较长循环时间，在***输送和释放等方面具有潜在的应用。
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如何制作纳米微球呢？
离子交联法是制作纳米微球的基本方法之一，适用于以壳聚糖、海藻酸钠等
为材料的纳米微球。其主要原理是作为***载体的材料通过离子交联法从乳
液中析出，同时通过氢键相互作用和疏水相互作用将***包埋在载体中，从
而制备成载药微球。该方法制备条件温和，整个过程不使用对人体有害的试
剂，也成为载药微球的理想制备方法之一。
纳米微球的典型制备方法还有“乳化-溶剂挥发法”和“微流控法”。“乳
化-溶剂挥发法”是将模型***先溶解于有机溶剂中,然后滴加到含有表面活
性剂的水相中,在均质机的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通过常压或减
压方式除去乳液分散相中的挥发性有机溶剂,使纳米粒硬化,***通过冷冻干
燥从水性混悬液中收集纳米粒。“微流控法”是一种在微米尺度的通道中操
控两种或几种互不相溶的微小体积液体,连续、可控地生产具有高度单分散尺
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这些荧光微球正广泛应用于生命科学研究的多个领域中，如： (1)细胞表面抗原的检测，包括CD4/CD8表面抗原的***计数;细胞表面低丰度表达受体的分析;骨髓移植受体内供体红细胞的检测;白色***抗原检测等。 (2)退行性神经病变示踪物，荧光微球具有***、与神经细胞结合时间长以及受注射部位影响极小的特点。 (3)吞噬功能的检测，0.6～2.0μm大小的荧光微球适合于这一类的研究，如分析大鼠中性粒细胞、人横纹导管细胞、小鼠腹膜巨噬细胞、人多核白细胞的吞噬功能或不同调理素调理作用对吞噬功能的影响等。 (4)血流分析，10-15 μm大小7种颜色的荧光可供研究组织中局部血流情况，如**脉管血流速率、视网膜和脉络膜循环、肺泡微管的功能直径定位等。 (5)敏感性诊断试剂，如替代一些已开展应用的微球诊断试验：胶乳凝集试验、微球捕获ELASA、双位点夹心法等，它较传统比色方法更为灵敏;另有新近诞生的流式微球分析技术(Cytometric Bead Array CBA)通过将不同荧光强度的聚苯乙烯微球包被上多种高特异性的单克隆抗体，在微球“三明治”平台上进行可溶性蛋白的检测，由此而使得1份微量标本可同时1次定量分析多种可溶性蛋白，**节约了样本量和操作时间，灵敏度也较传统的ELISA

一个乒乓球直径40毫米，重量2-3克。如果把乒乓球做到直径40纳米微球，由于1毫米是106纳米，
因此一个普通乒乓球就可以做出1018个直径40纳米微球。其表面积有5000多平米，相当与5个足
球场大小，同样重量的40纳米微球与40毫米乒乓球相比表面积增加了1012倍，因此纳米微球
表面吸附能力也增加了1012倍。当尺寸变小，表面吸附能力大幅度增加还是一个物理量变的过程，
而某些物质小到一定程度时，其性能还会出现质的变化。比如说量子点就是有一类物质当尺寸小到
纳米尺度时，这些物质就会发生质的变化，由原本不发光的物质变成会发光的物质，而且发光的颜
色或波长与尺寸还有关系。因此只要控制这些物质的尺寸就可以控制这类物质的发光波长。材质不
变，只依靠尺寸的变化就可以改变其性能的巨大变化就是纳米技术领域兴起的重要原因之一。另外
一个案例也可以说明这个问题。一个普通塑料（聚苯乙烯）组成的微球，当其尺寸与光的波长相当

在水处理领域：功能性的微球可以除去水里有机杂质和金属离子成分，可制备用在半导 体工业，医药，核工业等的超纯水，也可用于净化日常饮用水。水为人类洗涤了污秽， 微球却可以铲除水里的污秽，到达净化水的目的。 在血液净化领域：微球可以替代肾脏用来去除血液0物质，***和延长病人寿命。 微球是制造人工肾的关键材料。 在计量领域：粒径高度均一的微球可以作为标准颗粒用于精确测量常规尺子无法计量的 纳米尺寸的物质，标准颗粒作为计量工具也可用于矫正精密计量仪器。 在医疗诊断领域：功能化微球如磁性微球，多色荧光编码微球可***地应用于免疫分析， 进行多样品或多标靶的高通量检测。由于微球的使用，使我们可以更快速，方便地进行疾 病检测和诊断。 在生物技术领域：微球由于具有极高的表面积并且容易分散在培养液中，因此在动物细胞 培养上，微球作为动物细胞载体能够提供大量的比表面积让细胞在其表面生产，微球作为 动物细胞培养的载体，能够在有限的空间实现细胞的高密度培养，而且控制简单，生产重 复性好。南京专业载药微球

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包埋法方法简单，由于适用的多为水溶性天然高分子，因此其生物相容性好，表面富含多种功能基团，容易直接偶联生物大分子，但是其主要缺点是制备的微球粒径分布宽，形状不规则，磁粒子在不同微粒内含量不均一，各微球磁响应能力差别大，在外环境中易发生磁泄漏。而且包覆的壳层中难免会有些乳化剂之类的杂质，使其在生物医用等领域的应用受到一定的限制。
2.2原位法
原位法是一种制备弥散型结构磁性高分子复合微球的方法，该方法主要步骤如下：首先制备出多孔型高分子微球，然后通过磺化或硝化处理，使高分子微球能与铁、猛、钴等金属离子具有亲和性，***将制备的微球中加入铁盐，在碱性条件氧化沉淀铁离子，使得磁性粒子在高分子微球的孔中生成，**终得到磁性复合微球。Ugelstad等釆用此法制备出磁性高分子微球且开发了一系列已商品化的产品(Dynabeeds)，并在微生物免疫学、分子生物学和**等领域具有广泛应用。
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