干粉培养基的制备与使用:干粉培养基制备的关键是控制成分比例准确和混合均匀。首先按照制备配方精确称量所需成分,然后在无菌条件下将其混合均匀,并在高真空下冻干得到干粉培养基。在使用前,将所需量的干粉培养基加入无菌蒸馏水中,经过充分搅拌和加热灭菌后即可使用。干粉培养基的使用方法和液体培养基类似。首先将制备好的培养基倒入灭菌好的培养皿、试管、瓶子等容器中,然后接种微生物,放入恒温培养箱中进行培养。在培养过程中,不同微生物对于温度、氧气、CO2 等环境条件的要求是有所不同的,需要选择相应的恒温箱和合适的培养条件。黄色布氏菌芽孢杆菌常用的培养基为营养琼脂平板培养基。缓冲蛋白胨水(BPW) GB/SN
干粉培养基的组成:干粉培养基通常由基础草料、营养(或培养)成分、缓冲剂、指示剂、氨基酸、维生素和其他有机化合物等组成。具体成分的选择和比例取决于所需培养的微生物类型和生长条件。基础草料通常由各种蛋白质来源(如动物肌肉、黄豆、酵母等)组成,提供微生物生长所需的碳、氮、磷、硫、镁、铁等元素。营养(或培养)成分则包括转化碳源、氮源、磷酸盐、微量元素等,是培养基的主要能量源和合成原料。缓冲剂用于维持培养基的 pH 值稳定,适当的 pH 值对于微生物生长和代谢至关重要。指示剂常用于检测微生物在培养基中的生长和代谢情况,如酚红、溴蓝、氧化亚铁等。氨基酸和维生素等是微生物在生长过程中所需的营养物质,能够促进微生物的代谢和生长。缓冲蛋白胨水(BPW) GB/SN经过无菌处理的培养基能保证无細菌污染。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。
需要特别注意的是,预装培养基的储存时间不能太长。虽然一般来说,预装培养基可以在 4℃ 到 8℃ 的环境下保存数个月的时间,但是长时间的储存也会导致培养基失去一定的活性和营养价值。因此,建议在使用预装培养基之前,应该先检查一下储存时间和储存条件是否符合要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。预装培养基的储存温度和储存条件至关重要,在实验室工作中应该引起足够的重视。在使用预装培养基时,应当注意储存温度不能太高,要存放在干燥、阴凉、避光和密封的地方,同时也需要注意储存时间不能太长,以保证培养基的效果和实验结果的准确性。血肉汤是含有动物红细胞和肉浸出物的液体培养基,适用于需要求血因子的微生物。
干粉培养基的制备首先需要准备所需的原材料。不同的干粉培养基制备方法可能需要不同的原材料,但大多数情况下都需要葡萄糖、胰蛋白酶胨、酵母提取物等基础成分。此外,还需要添加一些其他成分来满足特定实验需求,如氨基酸、维生素、某些特定类型的糖类等。在保持实验环境干净卫生的前提下,开始称量所需原材料。称量时应注意不同成分的比例和用量,确保配方的准确性。称量完毕后,将所有原材料放入搅拌桶中进行混合。混合时应充分搅拌,直到所有成分混合均匀。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA) TGE肉汤(含TTC) 四号琼脂基础/4号琼脂基础 O/F试验用培养基(HLGB)。缓冲蛋白胨水(BPW) GB/SN
在有些情况下,培养基还需要进行一些化学处理。缓冲蛋白胨水(BPW) GB/SN
根据微生物培养基的用途、性质和功能,可以将培养基分为许多不同的类型,其中包括细菌和细菌培养基,动物/植物细胞培养基、凝血素和培养基酶,等等。这些培养基的种类和配方的不断发展和改进,将有助于更好地揭示微生物营养和生长的本质,并进一步推动微生物学在生命科学中的应用和发展。培养基是微生物学研究的基本工具之一,各种类型的培养基在微生物检测、鉴定、筛选等方面发挥了重要的作用。了解培养基的种类、配方和特性,以及各种培养基的应用场景和注意事项,有助于熟练掌握培养技术,提高微生物实验的效率、准确性和经济性。缓冲蛋白胨水(BPW) GB/SN