月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。VRBA中的溴青紫红是一种指示剂,具有抑菌和变色作用。支原体琼脂培养皿
pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液是一种常用的微生物学培养基,其特点如下:1.**成分**:主要由蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、无水磷酸氢二钠等组成,这些成分为微生物提供氮源、碳源、维生素和矿物质,同时维持培养基的渗透压和pH值。2.**pH值**:调节至7.0,为中性环境,适合多种微生物的生长需求。3.**缓冲能力**:磷酸二氢钾和磷酸氢二钠作为缓冲剂,有助于维持培养基的pH稳定。4.**用途**:主要用于药品、生物制品的稀释、冲洗液,也可用于细菌的前增菌或样品制备。5.**制备方法**:通常称取一定量的干燥培养基粉末,加热溶解于1000ml纯化水中,分装后进行高压灭菌。6.**质量控制**:在使用前,应进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的质量符合标准。7.**储存条件**:应在2-25℃的条件下避光保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在适当的储存条件下,通常有效期为三年。9.**注意事项**:在使用过程中,应遵循无菌操作规程,避免污染。改良BPLS琼脂预装培养皿去氧胆酸盐琼脂培养基中含有去氧胆酸盐,这是一种天然的胆酸盐,能够抑制大多数革兰氏阳性菌的生长。
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)是一种用于选择性分离培养肠道致病菌,特别是沙门氏菌和志贺氏菌的培养基。以下是DHL培养基的一些主要特点:1.**用途**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧胆酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁铵、中性红和琼脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢产生,使菌落中心呈黑色;中性红作为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。4.**用法**:称取65.2g培养基,加热溶解在1000ml蒸馏水中,待冷至60℃时倾入无菌平皿,无需高压灭菌。5.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和福氏志贺氏菌CMCC(B)51572,观察其生长率和特异性反应。6.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。通过添加适量的血液,BHI Agar能够满足一些苛养菌的生长需求,常用于酵母和霉菌的培养。
胆盐乳糖培养基(BileLactoseBroth,简称BL培养基)是一种在微生物检测中用于增菌培养的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾,其中蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钾和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。4.**使用方法**:将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,加热溶解后分装,121℃高压灭菌15分钟,待冷至常温后备用。5.**质量控制**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌等,观察其生长情况和特征性反应,以确保培养基的适用性。6.**应用**:除了用于药品检测,还用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,提高检出率。7.**相关产品**:胆盐乳糖培养基与其他用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌检验的培养基一同使用,如曙红亚甲基蓝琼脂培养基(EMB)、4-甲基伞形酮糖苷酸培养基(MUG培养基)等。
EMB培养皿是用于培养和检测肠道革兰氏阴性杆菌的一种特殊培养基。支原体琼脂培养皿
麦康凯琼脂培养基(MacConkeyAgar,简称MacC培养基)是一种用于微生物学研究和临床诊断中分离和识别肠道细菌的培养基,具有以下特点:1.**选择性培养**:利用胆盐抑制革兰氏阳性细菌的生长,同时促进革兰氏阴性细菌,特别是大肠杆菌的生长。2.**成分**:包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、中性红和琼脂。其中乳糖作为可发酵的糖类,中性红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。3.**pH值**:pH值控制在7.4±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。4.**菌落特征**:大肠杆菌在MacC培养基上生长时,由于发酵乳糖产酸,菌落周围会出现胆盐沉淀的浑浊圈,并且菌落本身可能呈现粉红色。5.**检验原理**:通过乳糖发酵和中性红的颜色变化,可以将分解乳糖和不分解乳糖的细菌区分开。6.**制备方法**:通常需要将培养基粉末溶解在蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。7.**微生物灵敏度试验**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的适用性。8.**应用**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,如大肠埃希氏菌和志贺氏菌等。9.**注意事项**:在制备和使用过程中,需要做好防护措施,确保无菌操作。支原体琼脂培养皿