连四硫酸盐肉汤培养基(TetrathionateBroth,TTB)是一种用于分离和富集沙门氏菌的选择性富集培养基。它通常包含胰酪蛋白胨、动物组织消化物、胆盐、碳酸钙、硫代硫酸钠等成分。这种培养基通过提供特定的营养和抑制剂,有助于沙门氏菌的生长,同时抑制其他杂菌。以下是一些关于连四硫酸盐肉汤培养基的基础配方和使用信息:1.**配方**(每升):-胰酪蛋白胨(PancreaticDigestofCasein):2.5g-动物组织消化物(PepticDigestofAnimalTissue):2.5g-胆盐(BileSalts):1.0g-碳酸钙(CalciumCarbonate):10.0g-硫代硫酸钠(SodiumThiosulfate):30.0g-碘(Iodine)和碘化钾(PotassiumIodide):根据具体配方调整2.**配制方法**:-称取适量的培养基粉末,加入去离子水或蒸馏水。-加热煮沸以确保所有成分完全溶解。-分装至适宜的容器中,并进行高压灭菌。3.**使用说明**:-接种样品后,培养基可以在35°C或43°C下培养12至24小时。-培养后,可以将培养物接种到其他选择性培养基上,如XLD琼脂、亚硫酸铋琼脂、SS琼脂等,以进一步分离和鉴定沙门氏菌。胰蛋白胨琼脂培养皿可以根据微生物的形态、生长速率、菌落颜色等特征进行初步鉴定。UBA预装培养皿
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。胰蛋白胨胆汁琼脂预装培养皿胰蛋白胨琼脂培养皿是一种常用的培养基,TSA板的基本组成包括胰蛋白胨、大豆胨、琼脂以及其他辅助成分。
硫乙醇酸盐流体培养基(FluidThioglycollateMedium,FT)是一种使用的微生物培养基,特别适合于需氧菌、微需氧菌和厌氧菌的培养。以下是FT培养基的特点介绍:1.**营养成分**:FT培养基含有胰酪胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化钠、L-胱氨酸、硫乙醇酸盐、琼脂和刃天青等成分。这些成分为细菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压。2.**氧梯度环境**:FT培养基的不同深度提供了从上层的有氧环境到下层的无氧环境的梯度,适合不同需氧性的细菌生长。3.**降低氧化还原电位**:胱氨酸、硫乙醇酸盐和葡萄糖有助于降低培养基的氧化还原电位,防止过氧化物积累对细菌产生毒性,有利于厌氧菌的生长。4.**氧化还原指示剂**:刃天青作为氧化还原指示剂,其颜色变化(氧化时呈红色,还原时无色)可以指示培养基的氧化还原状态。5.**琼脂作用**:少量琼脂的加入可以防止液体对流,减少氧气和二氧化碳的扩散,有利于厌氧环境的形成。6.**无菌操作**:在灭菌和使用过程中应避免摇晃和暴露于空气中过长,以防止培养基被氧化。
叶酸测定培养基是一种专门用于测定食品中叶酸含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:该培养基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作为氮源和碳源,乙酸钠作为选择剂和能量物质,以及氯化钠、硫酸锰等盐离子和多种维生素成分,为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值调节至6.8±0.2,以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于食品中叶酸的微生物测定,如GB5009.211-2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中所述。4.**制备方法**:通常将干粉培养基与蒸馏水或去离子水混合,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管中,每管5ml,加入标准品或测试样品,用无菌蒸馏水或去离子水调整体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株(如鼠李糖乳杆菌ATCC7469)接种待测试培养基,在36±1℃下培养20-40小时,观察生长情况,如肉汤混浊和试管呈梯度浑浊。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应遵循无菌操作,避免污染,确保水的洁净程度,因为水中的叶酸残留或容器的污染直接影响试验结果。接种: 使用无菌的技术在琼脂培养基表面接种待测样品,可以是从食品、水样或其他来源收集的微生物样品。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。去氧胆酸是一种抑制肠道细菌生长的化合物,因此对于从非肠道来源中分离出的微生物具有选择性。6.5%氯化钠葡萄糖琼脂预装培养皿
VRBA也被用于监测食品和水的卫生质量,以及在临床微生物学实验室中进行一些肠道细菌的鉴定工作。UBA预装培养皿
pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。UBA预装培养皿