分类
1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。
2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。
3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（***）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。
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它的原理
根据抗原抗体反应和化学显色原理情况，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，较终通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。
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（1）ABC复合物的制备：（2）ABC法反应原理6．SP或SAP法（过氧化物酶标记的链霉卵白素或过氧化物酶标记的碱性磷酸酶染色）Streptavidin/peroxidaseorstrepta-vidin/alkalinephosphatase）※该法是ABC法基础上的进一步改良，使卵白素与链霉（而非生物素）结合，而后再结合PO。它有4个亚基可与生物素结合，灵敏特异，背景低，成本低。现在还有plus盒。优点是：更简便，放大倍数↑，等电点中性更适合组织。分子量小，穿透力↑。7．蛋白A—金法（Protein—Agoldmethod）~多用于电镜8．双重组化染色法应用双重免疫组织化学可在同一张切片，同一细胞或亚细胞结构内同时显示两种不同的抗原。9．免疫金—银染色法（Immunogold—silverstainingIGSS）固定——见前述注意事项：1．固定剂的选择：因组织而不同，注意质量和性能。2．固定方式的选择：①浸渍固定（参考文献）②灌注固定（+后固定）③蒸汽固定免疫组化染色步骤（以ABC法为例）1．切片脱蜡入水，入PBS洗三次/15分钟。2．封闭内源性过氧化物酶。用新配置的（在PAS或—HCL缓冲液）室温，30分钟。3．水洗，入PBS，洗三次，每次5分钟。4．减少非特异性着色用稀释20倍的正常血清（产生二次抗体动物血清！），室温，30分钟。
冰冻切片是借助低温冷冻将活检组织快速冻结达到一定的硬度进行制片的一种方法，手术中等待冰冻快速病理报告，以病变性质而决定手术方式和范围。而及时、准确的发出报告需要高质量的冰冻切片，鉴于冰冻切片常出现染色模糊不清的现象，对病理判断造成困难，甚至造成误诊或漏诊，实践中我们发现和组织固定、染色时返蓝有一定关系，为了提高冰冻制片质量，我们将FAA、Bouin氏液、88酒精三种固定液作了比较，并在染色中加用促蓝液，认为用88酒精固定液及染色时加用促蓝液制作的冰冻切片质量较理想，上海融享专注免疫组化服务。
染色免疫组化可以辅助病理诊断、指导、评估预后，所以在做免疫组化过程中的质控问题处理尤其重要［1］。随着免疫组化试剂新种类不断出现及方法的改进，特别是即用型试剂盒的出现，使抗体的标记更加简便、快捷，更加规范化。免疫组化标准化染色技术是一项实验性很强的技术，任何一个环节出现问题，都可以直接影响免疫组化结果，
【摘要】目的研究CEA免疫组化染色在检测系膜微转移及环周切缘(CRM)侵犯方面的价值。方法选取经纤维结肠镜及病理证实为直肠*病人40例，应用大组织切片技术对术后标本处理，分别行常规染色及CEA免疫组化染色，比较分析两种染色方法在检测系膜微转移及CRM侵犯方面的价值。结果CEA染色检测**浸润程度大于常规病理染色，差异有性（t=5.2**<0.001）
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——90年代分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展。——2000年各种免疫组化技术更加成熟，使免疫组化技术成为当今生物医学中形态、功能代谢综合研究的一项有力工具。其应用范围深达医学各个学科，是目前生命科学工作者应该掌握的基本技术之一。免疫组化技术技术分类（1）根据染色方式分成：①贴片染色②漂浮染色（2）根据Ag—Ab结合方式分成：①直接法②间接法③多层法（3）按标记物的性质分成：①免疫荧光技术（免疫荧光法）②免疫酶技术（酶标抗体法、桥法、PAD法、ABC法）③免疫金属技术（免疫铁蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫组化技术标记物（1）必要性：组织细胞内Ag—Ab结合反应一般是不可见的，若在镜下检测，则必须具有可视性标记物。（2）常用标记物①荧光素：较常用的是异硫一氰酸荧光素（Fluoresceinisothiocyanate，FITC）——荧光显微镜下呈绿色荧光四乙基罗达明（rho—damineRB200）——荧光显微镜下发橙红色荧光②酶：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④铁蛋白金等：主要应用于免疫电镜。其他：如同位素（因涉及污染和防护难一般不用）免疫组化技术应用凡是组织细胞内具有抗原性的物质。山西特殊染色免疫组化机构哪里有
